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sirna转染效率怎么看
不同细胞
siRNA转染效率
的检测问题
答:
博凌科为解答:1.通常情况下悬浮细胞转染效率较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低。HepG2的DNA转染效率大概有50%,siRNA暂时没做过。如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,
用只转染GFP质粒的孔做对照
,可以看出转染效率。如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下...
siRNA转染
答疑专题总结(下)
答:
Q17: RNAi很容易降解,
转染效率
很低。EntransterTM产品一般采用什么策略和技术来防范呢?A17:RNAi中,标准的非修饰的siRNA确实容易降解,这不仅在保存过程中,而且在转染过程中。对
siRNA的
降解,可以合成修饰的双链siRNA,以提高合成中的稳定性,使用合成好的siRNA,尽量严格做到不要受RNA酶的污染。对转染...
干货分享 |
siRNA转染
实验(上)
答:
转染前,细胞融合率的理想范围应在30%至60%,过高或过低可能影响转染效果。同时,
通过设置荧光标记的siRNA阴性对照,可以更准确地评估转染效率
,确保实验的可靠性和可重复性。结论与建议 siRNA转染实验需要细致的操作和精确的参数调控。通过理解RNAi的基本原理,优化储存和溶解步骤,以及选择和调整转染条件,科...
转染
实验注意事项(上)
答:
6. 阴性对照、阳性对照和荧光对照 使用乱序siRNA作为阴性对照,可以排除非靶向效应对实验数据的干扰。使用阳性对照(我司赠送GAPDH siRNA)可对实验流程进行质检,帮助快速分析实验中可能存在的问题。使用荧光对照可分析
siRNA的转染效率
,方便进行最佳实验条件摸索。
sirna
nc
怎么
设计-
如何
设计有效的
siRNA
答:
A:我们的
siRNA
适用于各种转染方法。转染方法和转染试剂的选择,需要根据细胞来选择,对于容易转染的细胞,常用的转染方法是脂质体转染。 Q:对于难转染的细胞,应该
如何
提高其
转染效率
?转染效率又该如何确定? A:1)对于贴壁细胞,推荐采用转染试剂转染即可;2)对于难转染的细胞的转染,如何提高转染效率的问题也是目前研究的技术...
siRNA转染效率
不理想的原因(1)
答:
调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功
转染siRNA的
细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时
转染效率
和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高。由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板...
如何
使用Lipo3000进行
siRNA的转染
答:
建议在细胞融合率达到70-90%时进行转染,这样能确保最佳的
效率
。对于转染试剂的用量,推荐直接使用5微升,既经济又精准。
siRNA转染
小贴士 令人惊喜的是,对于
siRNA的转染
,Lipo3000并不需要额外的P3000,这简化了操作步骤,节省了时间。操作流程详解 转染过程的核心步骤可以总结为:首先,将125微升的Opti-...
siRNA转染
实验
答:
siRNA的合成需要注意的是一定要选用高纯度的siRNA,siRNA的纯度直接关系到
转染效率
和沉默效率。siRNA的工作浓度和siRNA的设计、细胞种类、目标基因有关。建议一定进行相关的预实验优化各条件。3.选择合适的
siRNA转染
试剂 选择合适的siRNA转染试剂是的RNAi实验成功另一个关键。由于细胞毒性对siRNA实 验的影响非常...
293细胞的
siRNA转染
答:
我们实验室现在就在使用,
转染效率
能达到85%以上,以下附上详细的操作步骤,希望能帮到你。A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔 500 μl 培养基(不可加抗生素),使细胞在转染时密度在30-50% 。B.
siRNA
-RFect混合物准备:1. 6pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。2. 2μl RFect用50μ...
siRNA
在
转染
实验过程需要注意哪些事项?
答:
过多的siRNA将导致细胞毒性以至死亡。G.通过标记siRNA来优化实验:荧光标记的siRNA能用来分析siRNA稳定性和
转染效率
。标记的siRNA还可用作siRNA胞内定位及双标记实验(配合标记抗体)来追踪转染过程中导入了
siRNA的
细胞,将转染与靶蛋白表达的下调结合起来。
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