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sirna转染效率怎么看
转染
mirna inhibitor需要用rt-pcr检测吗
答:
理论上是可以用qPCR进行检测的。但是有一种情况可能检测不到抑制
效率
。即miRNA inhibitor是与miRNA发生结合从而抑制了miRNA发挥作用,但它并没有彻底降解miRNA。这种情况,需要结合靶基因mRNA的表达情况,或者通过检测靶基因的蛋白表达水平来判断inhibitor是否发挥作用。
悬浮细胞做RNA干扰,咋样才能提高
转染效率
答:
RNA干扰回复实验,主要是为了说明Off-target效应。 Off-target effects(脱靶效应)最早由Dharmacon科学家Jackson和他的同事们提出(Fedorov,Y.,et al. Off-targeting By
siRNA
Can Induce Toxic Phenotype. RNA Accepted (2006).)他们给细胞
转染
特定基因的单条siRNA后运用全基因组芯片检测技术鉴定表达上调/...
求助!!吸血虫细胞转染用什么转染试剂
转染效率
高!!
答:
能数清荧光个数,
转染效率
很低了,但是有些细胞自身很难转。一般转染后6小时就可以观察荧光了,如果时间间隔太长,会导致了荧光淬灭。我们实验室在做完RFect
siRNA转染
后基本选择48h小时后用mRNA水平检测 。楼主可以在48h小时后用mRNA水平检测,或者72h后蛋白水平检测,毕竟观察荧光效果只能作为一个参考。
求助做
SiRNA
质粒
转染
,
效率
低转染后细胞状态差
答:
做
SiRNA
质粒
转染
,
效率
低转染后细胞状态差 实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题。我觉得只要是注意以下2点就可以了:1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套。2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的。无...
A549细胞
转染
问题
答:
按照我的了解
siRNA的转染
是不带荧光标记的,你应该转是质粒DNA吧,请先确定一下;如果您转的是sirna,但是发现没有转进去,请先观察一下你的细胞情况,很有可能是因为细胞引起的转不成功,一般不介意您直接换转染试剂;转染问题还不可以解决的话可以留言给我。
观察细胞中蛋白的变化,要
转染
后多久能看出来
答:
观察细胞中蛋白的变化,要
转染
后多久能看出来 能抑制多长时间你需要自己检测。不同细胞、不同
siRNA
、不同转染试剂都会影响
效率
。但是假设你转染之后48小时或者72小时之后passage 细胞做MTT或者克隆形成实验,个人觉得是可以的(前提是你有48小时或72小时knockdown证据)。但是如果你knockdown效率不高的话,实验...
RFect
siRNA转染
试剂
答:
有关RFect
siRNA转染
试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利,并通过PCT覆盖国际上多个国家和地区。产品特点 1.卓越的细胞转染性能:细胞转染阳性率高达90%以上,基因敲除效果明显,A549细胞LaminA/C基因敲除
效率
在95%以上;2.极低的细胞毒性使实验结果更为客观:转染细胞死亡率不到10%;3.低浓度...
siRNA
答疑专题总结(上)
答:
换种说法,shRNA可以用来筛选,可以保证100%细胞都是KD的,因此positive的结果会更明显。
siRNA
由于
转染效率
以及提高转染效率带来的细胞毒性等等会削弱或叠加实验结果,如果你的靶蛋白功能非常强大不可或缺,那么可能会有比较明显的差异;而且siRNA成本很高。shRNA的缺点是,体内很多基因功能互补,那么一个功能...
小胶质细胞
转染sirna
效率
高吗
答:
三到五小时。
siRNA
(Small interfering RNA),是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。
SiRNA
是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。
怎样
提高Jurkat,E6-1细胞
转染效率
答:
或许楼主可以试试RFECT的操作步骤,本说明书适用于24孔培养板的
转染
实验,其他规格的培养板的用量参照下面表格,表格给出的是每孔的用量与体积。A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔 500 μl 培养基(不可加抗生素),使细胞在转染时密度在30-40% 。B.
siRNA
-RFectSP混合物准备:1. 6pmol ...
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