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转染sirna浓度
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siRNA转染
实验(上)
答:
选择适合的转染试剂至关重要,需预先与厂家沟通并参考相关文献,确保细胞类型适用。siRNA的浓度选择范围广泛,
1-100nM
,通过梯度实验找到最适合细胞系的浓度,这将决定转染效率、细胞毒性及基因沉默效果。转染前,细胞融合率的理想范围应在30%至60%,过高或过低可能影响转染效果。同时,通过设置荧光标记的siRN...
细胞
转染
实验的
siRNA
推荐
浓度
是多少
答:
博凌科解答:我实验合siRNA使用说明:
siRNA工作浓度般10-100nM
我准备用50nM做转染相同孔板同量siRNA加转 染试剂量相同所我觉存质粒DNA转染与转染试剂比例同影响转染效率问题siRNA能效干扰目蛋白表达加 量越应该沉默效越.合siRNA比较贵加花费合siRNA体外瞬转染干扰效致能维持2-5左右 ...
hela细胞
siRNA转染
条件?包括密度,siRNA以及转染试剂用量比例,详细一些...
答:
设置siRNA浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度
,每个梯度最好做2个复孔,转染前一天铺板,稀释siRNA和转染试剂的培养基必须是无血清培养基,血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合,影响转染效率
hepg2细胞
siRNA转染
条件?哪位大神指点一下。
答:
之前我们用过Lipo,说明书上要求细胞的密度在70%左右,同时在
转染
后的4-6小时注意要换培养液,后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent,细胞密度在45%左右 ,设置
siRNA
终
浓度
10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度最好做2个复孔,一般做转染前一天铺板,用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培...
sirna
转染
raw细胞最好用多大的
浓度
答:
博凌科解答:我实验合siRNA使用说明:
siRNA工作浓度般10-100nM
我准备用50nM做转染相同孔板同量siRNA加转 染试剂量相同所我觉存质粒DNA转染与转染试剂比例同影响转染效率问题siRNA能效干扰目蛋白表达加 量越应该沉默效越.合siRNA比较贵加花费合siRN ...
在
转染
RNAi时不小心加了双倍的RNA(相对说明书),请问会有什么影响啊...
答:
博凌科为解答:我的实验合成的siRNA的使用说明:siRNA的工作浓度一般是
10-100nM
,我准备用50nM做转染。相同的孔板中,不同的量的siRNA加的转 染试剂的量是相同的,所以我觉得不存在质粒DNA转染时与转染试剂的比例不同影响转染效率的问题。如果你的siRNA能有效干扰你的目的蛋白的表达,加的 量越大应该...
RAW264.7细胞
转染
详细点的注意事项及操作步骤
答:
1.细胞接种:一般做
转染
前一天接种/铺板(细胞计数大约5*10^4cell/ml),使做转染前细胞密度在30-50%。2.为了能在使用时有较好的转染效果,第一次使用建议您用24孔板做,每孔2ul转染试剂即可。将最佳转染条件(
siRNA
与转染试剂的用量、比例)放大到对应的孔板即可。3.设置siRNA终
浓度
10nM,30nM,50...
293T细胞
转染
答:
血清的存在会干扰
siRNA
与
转染
试剂的混合,从而影响转染效率。建议用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基是无血清培养基。我们实验室前段刚用RFect,siRNA方法做完A549细胞,细胞的铺板密度在45%左右,用的24孔板,每孔2ul试剂,设置的siRNA终
浓度
10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度做了2个复孔,方便...
siRNA
在
转染
实验过程需要注意哪些事项?
答:
F.通过合适的阳性对照优化
转染
和检测条件:对大多数细胞,看家基因是较好的阳性对照。将不同
浓度
的阳性对照的
siRNA
转入靶细胞(同样适合实验靶siRNA),转染48h后统计对照蛋白或mRNA相对于未转染细胞的降低水平,过多的siRNA将导致细胞毒性以至死亡。G.通过标记siRNA来优化实验:荧光标记的siRNA能用来分析siRNA...
293细胞的
siRNA转染
答:
我们实验室现在就在使用,
转染
效率能达到85%以上,以下附上详细的操作步骤,希望能帮到你。A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔 500 μl 培养基(不可加抗生素),使细胞在转染时密度在30-50% 。B.
siRNA
-RFect混合物准备:1. 6pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。2. 2μl RFect用50μ...
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