88问答网
所有问题
当前搜索:
荧光sirna转染效率怎么看
干货分享 |
siRNA转染
实验(上)
答:
转染前,细胞融合率的理想范围应在30%至60%,过高或过低可能影响转染效果。同时,
通过设置荧光标记的siRNA阴性对照,可以更准确地评估转染效率
,确保实验的可靠性和可重复性。结论与建议 siRNA转染实验需要细致的操作和精确的参数调控。通过理解RNAi的基本原理,优化储存和溶解步骤,以及选择和调整转染条件,科...
不同细胞
siRNA转染效率
的检测问题
答:
如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率
。如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下转染DNA好的话,转染siRNA也不会差的。个人觉得细胞本身的性质决定了转染效率。2.不是的。针对GFP的siRNA和我们通常用的化学合成的siRNA一样,只不过是针对...
siRNA转染效率
不理想的原因(1)
答:
由于RNA序列差异、合成条件不同以及是否带有
荧光
等标记,决定了RNA和转染试剂在不同情况下会有不同的最佳条件,建议先进行预实验优化。2. 细胞密度不佳 调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功
转染siRNA的
细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时
转染效率
和总的细胞数量就很...
siRNA转染
答疑专题总结(下)
答:
Q12: 阴性对照应该是与目的基因的序列无同源性的,那
如何
评价
转染效率
?A12: 带
荧光
的
siRNA
,不考虑序列,转染进去细胞内即可出现荧光,故可用于优化转染条件和评估转染效率。而沉默效率则和siRNA序列相关。Q13: 请问细胞水平实验,选择载体表达的shRNA还是小片段的siRNA?请问两种在转染效率和沉默时间等有什...
转染
实验注意事项(上)
答:
且对干扰效率的检测也有很大的影响。6. 阴性对照、阳性对照和
荧光
对照 使用乱序siRNA作为阴性对照,可以排除非靶向效应对实验数据的干扰。使用阳性对照(我司赠送GAPDH siRNA)可对实验流程进行质检,帮助快速分析实验中可能存在的问题。使用荧光对照可分析
siRNA的转染效率
,方便进行最佳实验条件摸索。
sirna
nc
怎么
设计-
如何
设计有效的
siRNA
答:
转染效率
的确定,常用的是使用
荧光
标记的siRNA,通过荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪检测的方法。具体可以参考我们的产品说明书。 Q:细胞的转染效率是否与siRNA序列相关? A:转染效率的高低取决于与细胞自身及转染方法,而于
siRNA的
序列并没有直接关系。因此,siRNA在不同的细胞转染效率可能不一样。 Q:
转染siRNA
时候的...
siRNA转染
实验
答:
2.合成的siRNA注意纯度和工作浓度 siRNA的合成需要注意的是一定要选用高纯度的siRNA,siRNA的纯度直接关系到
转染效率
和沉默效率。siRNA的工作浓度和siRNA的设计、细胞种类、目标基因有关。建议一定进行相关的预实验优化各条件。3.选择合适的
siRNA转染
试剂 选择合适的siRNA转染试剂是的RNAi实验成功另一个关键。
如何
使用Lipo3000进行
siRNA的转染
答:
建议在细胞融合率达到70-90%时进行转染,这样能确保最佳的
效率
。对于转染试剂的用量,推荐直接使用5微升,既经济又精准。
siRNA转染
小贴士 令人惊喜的是,对于
siRNA的转染
,Lipo3000并不需要额外的P3000,这简化了操作步骤,节省了时间。操作流程详解 转染过程的核心步骤可以总结为:首先,将125微升的Opti-...
293细胞的
siRNA转染
答:
我们实验室现在就在使用,
转染效率
能达到85%以上,以下附上详细的操作步骤,希望能帮到你。A. 细胞接种:转染前一天接种细胞,每孔 500 μl 培养基(不可加抗生素),使细胞在转染时密度在30-50% 。B.
siRNA
-RFect混合物准备:1. 6pmol siRNA 用50μl无血清培养基稀释。2. 2μl RFect用50μ...
荧光si RNA看
不到荧光
答:
1、通常情况下,FAM
转染
后显示绿色
荧光
,CY3转染后显示红色荧光。首先确认荧光激发波长是否正确,绿光波长为495 nm,红光为550 nm。2、转染后,需要立即清洗观察荧光,避免时间太久。3、产品保存不当,
siRNA
降解,FAM淬灭。FAM容易见光分解,所以请避光保存。4、转染时,要避光操作,避免FAM长时间暴露于...
1
2
3
4
5
6
7
8
9
涓嬩竴椤
其他人还搜
siRNA成功转染后荧光表现
转染miRNA后怎么看转染效率
siRNA溶解规则
sirna干扰效率怎么计算
转染效率怎么计算
sirna转染浓度越高越好
锐博转染试剂盒说明书siRNA
sirna引物的上下游怎么转染
空转染sirna的意义