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sirna转染效率怎么看
请问各位高手用什么转染试剂转RAW264.7
转染效率
比较高啊?
答:
请先把细胞养好,我实验室用Advanced Transfection Reagent
转染
试剂AD60015做了24孔板转染RAW264.7小鼠单核巨噬白血病细胞的转染,转染体系大概总结如下 转染质粒DNA:pcDNA3.1-GFP 质粒DNA大小:8000bp 转染完全培养基用量:500ul 转染试剂用量:2.5ul 转染细胞密度:80 ...
siRNA的
体内是
怎样
转录的?
答:
体内转录:最近有几个研究小组构建了一些可以在真核细胞内表达
siRNA的
载体,包括被广泛应用的质粒载体和新研发的
转染效率
较高的病毒载体。质粒载体(以Ambion公司提供的Psilencer系列质粒为例)都包含有一个RNA聚合酶Ⅲ(Pol:Ⅲ)启动子和一个45个连续的T构成的转录终止位点以及选择标记,选用Pol:Ⅲ启动...
如何
选择
siRNA转染
试剂
答:
细胞系不同,它们所需的转染条件自然也不相同。举例来说,悬浮培养的鼠类原代细胞,就比贴壁培养的人类细胞更难转染。此外,神经元和巨噬细胞也令人颇为头疼,标准方法很难将
siRNA转染
进去。不论是哪种情况,经验数据都具有无可取代的价值。查阅文献,与其他研究者多交流都能获得宝贵的信息。当然,我们也...
siRNA转染
和DNA转染有什么区别?
答:
Entranster-R4000 siRNA专用转染试剂,采用先进的纳米聚合物成分,细胞毒性非常低,转染时细胞密度可以低至20%,同时可以有血清有抗生素转染,转染后无需换液,
转染效率
高,细胞毒性小,节约时间、精力和试剂,目前被许多著名实验室选用,是一款优秀的
siRNA转染
试剂。
怎么
提高NIH 3T3 细胞
转染效率
答:
3T3细胞有不同类型的,NIH3T3就比较好转一些,3T3-L1难转。转染试验失败需要找一下原因:siRNA,转染试剂,细胞,差不多也就这几项。
转染效率
低要先排除一下是否是
siRNA的
问题,如果siRNA无效,换再好的转染试剂也白搭,可以用带荧光标记的control siRNA做一下看看,转进去的话会有荧光的。确实转染效率...
质粒与
siRNA转染
试剂的选择
答:
在原代肝癌细胞中,其质粒DNA
转染效率
可达80%以上,而细胞未见明显死亡。RFect系列质粒转染试剂的使用都非常方便,不需要使用特殊的低血清培养基,不需要额外增加培养基成本,也不需要苦苦等待培养4-6小时后换液,只需使用普通的血清培养基就可以了。表1 RFect系列质粒转染试剂 二、质粒DNA和
siRNA
均...
有哪些方法可以将
sirna
导入细胞内
答:
RNAi在哺乳动物细胞中通常用于阻断特定基因的表达从而研究基因的功能。成功的进行RNAi 的问题在于使
siRNA
导入细胞,将
sirna
导入细胞内常见的方法是 将靶向特定基因的大约21碱基长短的双链 siRNAs small interfering RNAs。或者是45 50 mer的发夹结构
RNA 转染
到细胞。此外通过质粒表达siRNAs 同样可以抑制特定...
如何
选择不同的
转染
方法
答:
细胞系不同,它们所需的转染条件自然也不相同。举例来说,悬浮培养的鼠类原代细胞,就比贴壁培养的人类细胞更难转染。此外,神经元和巨噬细胞也令人颇为头疼,标准方法很难将
siRNA转染
进去。不论是哪种情况,经验数据都具有无可取代的价值。查阅文献,与其他研究者多交流都能获得宝贵的信息。当然,我们也...
12孔板
转染
加多少optimem
答:
选择合适的
siRNA转染
试剂是的RNAi实验成功另一个关键。由于细胞毒性对siRNA实验的影响非常大,可以直接影响实验结论和结果,所以一定选择低毒性的转染试剂,看一个转染试剂毒性是否低,有一个简单的方法,
看转染
的过程和要求,比如要 求的细胞密度越大,说明毒性越大,比如转染复合物容许和细胞孵育的时间越短...
原核生物转录组测序原代细胞核酸
转染
仪简介
答:
专利创新技术,其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法,直接将DNA转到细胞核内,即使是原代细胞(包括不分裂的血细胞或神经元),转染后2-4小时就能检测到转染基因的表达。2、
转染效率
高,操作简单方便。
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