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sirna转染浓度越高越好
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siRNA转染
实验(上)
答:
选择适合的
转染
试剂至关重要,需预先与厂家沟通并参考相关文献,确保细胞类型适用。
siRNA的浓度
选择范围广泛,1-100nM,通过梯度实验找到最适合细胞系的浓度,这将决定转染效率、细胞毒性及基因沉默效果。转染前,细胞融合率的理想范围应在30%至60%,过高或过低可能影响转染效果。同时,通过设置荧光标记的siRN...
sirna 转染
raw细胞最好用多大的
浓度
答:
博凌科解答:我实验合
siRNA
使用说明:siRNA工作
浓度
般10-100nM我准备用50nM做
转染
相同孔板同量siRNA加
转 染
试剂量相同所我觉存质粒DNA转染与转染试剂比例同影响转染效率问题siRNA能效干扰目蛋白表达加 量越应该沉默效越.合siRNA比较贵加花费合siRN ...
细胞
转染
实验的
siRNA
推荐
浓度
是多少
答:
博凌科解答:我实验合
siRNA
使用说明:siRNA工作
浓度
般10-100nM我准备用50nM做
转染
相同孔板同量siRNA加
转 染
试剂量相同所我觉存质粒DNA转染与转染试剂比例同影响转染效率问题siRNA能效干扰目蛋白表达加 量越应该沉默效越.合siRNA比较贵加花费合siRNA体外瞬转染干扰效致能维持2-5左右 ...
siRNA转染
实验
答:
siRNA的合成需要注意的是一定要选用高纯度的siRNA,siRNA的纯度直接关系到转染效率和沉默效率。siRNA的工作
浓度
和siRNA的设计、细胞种类、目标基因有关。建议一定进行相关的预实验优化各条件。3.选择合适的
siRNA转染
试剂 选择合适的siRNA转染试剂是的RNAi实验成功另一个关键。由于细胞毒性对siRNA实 验的影响非常...
siRNA
在
转染
实验过程需要注意哪些事项?
答:
E.选择合适的
转染
试剂:针对
siRNA
制备方法以及靶细胞类型的不同,选择
好
的转染试剂和优化的操作对siRNA实验的成功至关重要。F.通过合适的阳性对照优化转染和检测条件:对大多数细胞,看家基因是较好的阳性对照。将不同
浓度
的阳性对照的siRNA转入靶细胞(同样适合实验靶siRNA),转染48h后统计对照蛋白或mRNA...
在
转染
RNAi时不小心加了双倍的RNA(相对说明书),请问会有什么影响啊...
答:
不同的量的
siRNA
加的
转 染
试剂的量是相同的,所以我觉得不存在质粒DNA
转染
时与转染试剂的比例不同影响转染效率的问题。如果你的siRNA能有效干扰你的目的蛋白的表达,加的 量越大应该沉默效果
越好
.只是合成的siRNA比较贵,多加多花费。合成的siRNA体外瞬时转染,干扰效果大致能维持2-5天左右。
siRNA转染
效率不理想的原因(1)
答:
调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功
转染siRNA的
细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染效率和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高。由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板...
hela细胞
siRNA转染
条件?包括密度,siRNA以及转染试剂用量比例,详细一些...
答:
SIRNA
做过hela细胞的
转染
,用的24孔培养板,将siRNA 稀释液与试剂稀释液混合,细胞铺板密度在45%左右。 设置
siRNA浓度
10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度最好做2个复孔,转染前一天铺板,稀释siRNA和转染试剂的培养基必须是无血清培养基,血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合,影响转染效率 ...
如何使用Lipo3000进行
siRNA的转染
答:
建议在细胞融合率达到70-90%时进行转染,这样能确保最佳的效率。对于转染试剂的用量,推荐直接使用5微升,既经济又精准。
siRNA转染
小贴士 令人惊喜的是,对于
siRNA的转染
,Lipo3000并不需要额外的P3000,这简化了操作步骤,节省了时间。操作流程详解 转染过程的核心步骤可以总结为:首先,将125微升的Opti-...
不同细胞
siRNA转染
效率的检测问题
答:
1.通常情况下悬浮细胞
转染
效率较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低。HepG2的DNA转染效率大概有50%,
siRNA
暂时没做过。如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率。如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下转染DNA
好
的话...
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