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    • 以质粒作为模板,pcr出现拖尾现象,为什么?

    如题所述

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    推荐答案   2012-08-17
    我觉得原因是：你用的质粒浓度太高了。你要是按照普通基因组DNA PCR的浓度来做质粒PCR，或者稀释了质粒DNA但不够倍数，那结果有拖带是可能的。
    我一般20ul体系，质粒DNA浓度只需要0.05ng/ul 然后只取0.5-1ul。反应25-30个循环就很亮了。
    温馨提示：答案为网友推荐，仅供参考
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    第1个回答  2012-08-16
    没有具体描述，只能给出几个猜测。
    你先看看marker跑得好不好。
    marker也不好的话：
    1.跑胶时电压太高
    2.染料问题
    3.胶没做好
    如果marker没有问题的话：
    1.loading buffer 可能有细菌污染
    2.pcr问题本回答被网友采纳
    第2个回答  2012-08-16
    没有控制好温度
    第3个回答  2021-02-04

    第4个回答  2012-08-16
    跑太快了
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    以质粒作为模板,pcr出现拖尾现象,为什么?答：1.loading buffer 可能有细菌污染 2.pcr问题
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    提质粒最后电泳拖尾什么原因答：第一有可能质粒的双链DNA破碎了，看来是你第一步重悬的过程对DNA造成一定程度的损害了，按说2000rpm，5min沉淀菌体，然后再加I液重悬，震荡1min就应该搞定的，顶多2min；第二种可能就是RNA没有除干净，拖尾的就是小分子的RNA片段，试着多加点RNA酶吧 ...
    问一下,就是,请问电泳DNA是否出现拖尾现象是要怎么判断的?答：1. PCR产物出现拖尾的因素有很多，总结为一条，就是非特异性扩增过多。原因可能是：（1） 模板不纯：解决方法，纯化模板 （2） Buffer不合适：解决方法，更换Buffer （3） 退火温度偏低：解决方法，适当提高退火温度 （4） 酶量过多：解决方法，适量用酶，或调换另一种酶 （5） dNTP、Mg2+浓度...
    如果看到质粒dna条带有拖尾现象,试述此现象是有什么原因答：浓度太高，电压太高，胶不对！
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    提取的DNA在电泳过程中出现严重的拖尾是什么原因答：有杂质，或是断的太很
    DNA拖尾现象是什么原因答：原因有以下：1、 可以考虑是不是样品不纯，目的产物与杂带相差不大，所以要多跑一段时间才有尾巴。参考marker,marker应该不会有。如果有的话说明配胶有问题。2 、琼脂糖检测DNA一般去1~5微升原液，加2微升溴酚蓝便可，注意上样浓度；3、可能是原液浓度太大造成的；4、可能DNA已降解。5、在提取前...
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