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pcr拖尾现象
PCR
跑胶,目的条带很亮,但是边沿不清楚,前后有
拖尾现象
,请教各位是...
答:
8 加样量过大
。过多的量会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更明显。9制胶过程中胶孔没 制好。10 EB没有冲洗干净。11模板混有基因组DNA,或模板中混有蛋白。12非特异反映。引物设计的不好,非特异,这种情 况容易出现非特异扩增造成有非特异性扩增带或拖尾现象。13电泳液...
这是我的
pcr
产物凝胶电泳图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
答:
正常现象
,没必要大惊小怪,你如果是用基因组作为模板的话,出现拖尾是很正常的现象,毕竟基因组序列那么大,出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的,如果是其他的DNA作为模板,则有可能是你的模板不纯造成的,另外体系中有些物质,比如SDS也可能显示一些假带,造成判带困扰,所以你可以无视这...
pcr
条带
拖尾
是什么意思
答:
PCR条带拖尾是指在聚合酶链式反应(PCR)过程中,DNA扩增产物在电泳分离时出现的一种现象
。该现象是由于聚合酶在扩增反应末期,因为模板DNA已经完全扩增,但聚合酶仍在作用,使得扩增产物末端不断地添加不必要的碱基而产生的。这些多余的碱基在电泳分离时被视为拖尾现象。PCR条带拖尾在许多实验中都是被认...
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多
,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
您好,我的
PCR
突然出现了严重的
拖尾
,前面做的结果很好,近两个月阴性对照...
答:
原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2 浓度偏高 6.循环次数过多
对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR
产物电泳
拖尾
,可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
如何消除
PCR
的
拖尾
答:
消除
PCR拖尾
的方法:1、纯化模板 2、更换Buffer 3、适当提高退火温度 4、适量用酶 5、适当降低dNTP和镁离子的浓度 6、减少循环次数 PCR拖尾产生的原因:1、模板不纯 2、Buffer不合适 3、退火温度偏低 4、酶量过多 5、dNTP、Mg 2*浓度偏高 6、循环次数过多 ...
pcr
跑胶结果出现
拖尾
、弥散说明什么?
答:
可能是产物降解,也可能引物、模版的量上的比较大。适当减少循环,调整引物、模版的量
pcr
产物在电泳仪中跑胶出现
拖尾现象
是怎么回事
答:
有一下几种可能性:
PCR
扩增产物浓度很高,overloading造成的拖带 模板量加太多了 引物或者模板的原因,条带扩增的时候带入了很多杂带
为什么
pcr
的时候,DNA模板浓度高了,会有
拖尾
?
答:
因为
pcr
利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。DNA模板纯度不纯的时候,会对
PCR
起抑制作用。PCR反应中,模板只要1ng就可以,所以模板浓度不要太高。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)。并混入限量的一种不...
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