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pcr条带严重拖尾
PCR
跑胶,目的
条带
很亮,但是边沿不清楚,前后有
拖尾
现象,请教各位是什 ...
答:
3提高退火温度,减少非特异性扩增
。4减少循环次数,减少非特异性扩增。5电泳缓冲液时间太长,ph值和盐离子浓度明显 改变。6电泳时电压不能太高,8V/cm。7一般来讲,基于promega和TaKaRa的PCR反应体系中,Mg和dNTP的浓度是相 匹配的,不需改动。8 加样量过大。过多的量会造成加样孔超载,从而导致...
您好,我的
PCR
突然出现了
严重
的
拖尾
,前面做的结果很好,近两个月阴性对照...
答:
原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2 浓度偏高 6.循环次数过多
对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数
如何消除
PCR
的
拖尾
答:
PCR拖尾产生的原因:
1、模板不纯
2、Buffer不合适 3、退火温度偏低 4、酶量过多 5、dNTP、Mg 2*浓度偏高 6、循环次数过多
质粒
pcr条带拖尾
现象
严重
,出现好几次,求解释
答:
1,引物设计不佳
,造成了拖尾现象。2,
PCR中DNA浓度加的太多,造成了拖尾
。3,
mg2+浓度加的太高
,造成了拖尾。4,
跑胶电压不合适
,造成了拖尾。5,退火温度不合适,造成了拖尾。这些都可能造成拖尾,请认真分析之。谢谢。
pcr条带拖尾
是什么意思
答:
PCR条带拖尾是指在聚合酶链式反应(PCR)过程中,DNA扩增产物在电泳分离时出现的一种现象
。该现象是由于聚合酶在扩增反应末期,因为模板DNA已经完全扩增,但聚合酶仍在作用,使得扩增产物末端不断地添加不必要的碱基而产生的。这些多余的碱基在电泳分离时被视为拖尾现象。PCR条带拖尾在许多实验中都是被...
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR
产物电泳
拖尾
,可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
这是我的
pcr
产物凝胶电泳图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
答:
出现
拖尾
是很正常的现象,毕竟基因组序列那么大,出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的,如果是其他的DNA作为模板,则有可能是你的模板不纯造成的,另外体系中有些物质,比如SDS也可能显示一些假带,造成判带困扰,所以你可以无视这种现象,只关心你的目的
条带
是否扩增出来即可 ...
PCR
产物跑胶
严重拖尾
,换了好几种酶和体系也还是一样,(Tm为55,循环25...
答:
引物不合适吧,要不就是退火温度太低,或者模板量太多
以质粒作为模板,
pcr
出现
拖尾
现象,为什么?
答:
我觉得原因是:你用的质粒浓度太高了。你要是按照普通基因组DNA
PCR
的浓度来做质粒PCR,或者稀释了质粒DNA但不够倍数,那结果有拖带是可能的。我一般20ul体系,质粒DNA浓度只需要0.05ng/ul 然后只取0.5-1ul。反应25-30个循环就很亮了。
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR
产物电泳
拖尾
,可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
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