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pcr跑胶条带拖尾
PCR跑胶
,目的
条带
很亮,但是边沿不清楚,前后有
拖尾
现象,请教各位是什 ...
答:
12非特异反映
。引物设计的不好,非特异,这种情 况容易出现非特异扩增造成有非特异性扩增带或拖尾现象。13电泳液用久了不换,电泳胶脏了 。14扩增的条件不合适,一般退火温度低时容 易使引物在非特异位置结合引发扩增反应造成拖尾。针对以上情况,可以先提高退火温度试试,如果实在不行,再看看引物是不...
这是我的
pcr
产物凝胶电泳图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
答:
正常现象
,没必要大惊小怪,你如果是用基因组作为模板的话,出现拖尾是很正常的现象,毕竟基因组序列那么大,出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的,如果是其他的DNA作为模板,则有可能是你的模板不纯造成的,另外体系中有些物质,比如SDS也可能显示一些假带,造成判带困扰,所以你可以无视这...
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多
,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
pcr条带拖尾
是什么意思
答:
PCR条带拖尾是指在聚合酶链式反应(PCR)过程中,DNA扩增产物在电泳分离时出现的一种现象
。该现象是由于聚合酶在扩增反应末期,因为模板DNA已经完全扩增,但聚合酶仍在作用,使得扩增产物末端不断地添加不必要的碱基而产生的。这些多余的碱基在电泳分离时被视为拖尾现象。PCR条带拖尾在许多实验中都是被认...
以质粒作为模板,
pcr
出现
拖尾
现象,为什么?
答:
我觉得原因是:你用的质粒浓度太高了
。你要是按照普通基因组DNA PCR的浓度来做质粒PCR,或者稀释了质粒DNA但不够倍数,那结果有拖带是可能的。我一般20ul体系,质粒DNA浓度只需要0.05ng/ul 然后只取0.5-1ul。反应25-30个循环就很亮了。
pcr跑胶
结果出现
拖尾
、弥散说明什么?
答:
可能是产物降解,也可能引物、模版的量上的比较大。适当减少循环,调整引物、模版的量
pcr
产物跑的电泳,为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR
产物电泳
拖尾
,可能有如下原因:a.模板不纯.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
如何消除
PCR
的
拖尾
答:
消除
PCR拖尾
的方法:1、纯化模板 2、更换Buffer 3、适当提高退火温度 4、适量用酶 5、适当降低dNTP和镁离子的浓度 6、减少循环次数 PCR拖尾产生的原因:1、模板不纯 2、Buffer不合适 3、退火温度偏低 4、酶量过多 5、dNTP、Mg 2*浓度偏高 6、循环次数过多 ...
pcr
产物在电泳仪中
跑胶
出现
拖尾
现象是怎么回事
答:
有一下几种可能性:
PCR
扩增产物浓度很高,overloading造成的拖带 模板量加太多了 引物或者模板的原因,
条带
扩增的时候带入了很多杂带
您好,我的
PCR
突然出现了严重的
拖尾
,前面做的结果很好,近两个月阴性对照...
答:
原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2 浓度偏高 6.循环次数过多 对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数
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