您好,我的PCR突然出现了严重的拖尾,前面做的结果很好,近两个月阴性对照也拖尾

降低模板量也不行,不知道什么原因,就是突然出现的。

第1个回答  2014-05-08
原因: 1.模板不纯 2.Buffer不合适 3.退火温度偏低 4.酶量过多 5.dNTP、Mg2 浓度偏高 6.循环次数过多 对策: 1.纯化模板 2.更换Buffer 3.适当提高退火温度 4.适量用酶 5.适当降低dNTP和镁离子的浓度 6.减少循环次数追问

那我前面是一样的条件怎么不会出现拖尾呢?前面做的是一样的体系一样的条件啊

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