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pcr产物条带弥散拖尾
pcr条带拖尾
是什么意思
答:
PCR条带拖尾是指在聚合酶链式反应(PCR)过程中,DNA扩增产物在电泳分离时出现的一种现象
。该现象是由于聚合酶在扩增反应末期,因为模板DNA已经完全扩增,但聚合酶仍在作用,使得扩增产物末端不断地添加不必要的碱基而产生的。这些多余的碱基在电泳分离时被视为拖尾现象。PCR条带拖尾在许多实验中都是被认...
rna
条带拖尾
的原因
答:
1、非特异性扩增过多:PCR产物出现拖尾的一个常见原因是非特异性扩增过多
。2、样品降解或存在RNA:样品在电泳前发生了降解或存在RNA,也导致条带拖尾的出现。3、引物二聚体:引物二聚体的存在也是导致RNA条带拖尾的一个原因。
PCR
跑胶,目的
条带
很亮,但是边沿不清楚,前后有
拖尾
现象,请教各位是什 ...
答:
4减少循环次数,减少非特异性扩增
。5电泳缓冲液时间太长,ph值和盐离子浓度明显 改变。6电泳时电压不能太高,8V/cm。7一般来讲,基于promega和TaKaRa的PCR反应体系中,Mg和dNTP的浓度是相 匹配的,不需改动。8 加样量过大。过多的量会造成加样孔超载,从而导致拖尾和弥散,对于较大的DNA此现象更...
质粒
pcr条带拖尾
现象严重,出现好几次,求解释
答:
1,引物设计不佳
,造成了拖尾现象。2,
PCR中DNA浓度加的太多,造成了拖尾
。3,
mg2+浓度加的太高
,造成了拖尾。4,
跑胶电压不合适
,造成了拖尾。5,退火温度不合适,造成了拖尾。这些都可能造成拖尾,请认真分析之。谢谢。
pcr
跑胶结果出现
拖尾
、
弥散
说明什么?
答:
可能是产物降解,也可能引物、模版的量上的比较大
。适当减少循环,调整引物、模版的量
PCR
部分样本
条带弥散
,怎么办
答:
观察是否
条带拖尾
。其次引物可以重新稀释,换
PCR
体系,防止污染或者引物降解。另外出现这种涂抹带还有可能是酶加多了,甘油有影响,注意吸取酶的量。考虑到你的引物是成熟的,如果所有组是同样的体系同时做的话,则实验中的成功案例可视为阳性对照,因此考虑模板降解的可能性更大。建议重新准备模板。
跑胶
弥散
和
拖尾
各是什么现象
答:
电泳出现
拖尾
现象,英文成为smear,就是
弥散
。其原因,主要从以下两个方面考虑: 1、
PCR产物
自身原因: 往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。 对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③...
以质粒作为模板,
pcr
出现
拖尾
现象,为什么?
答:
我觉得原因是:你用的质粒浓度太高了。你要是按照普通基因组DNA
PCR的
浓度来做质粒PCR,或者稀释了质粒DNA但不够倍数,那结果有拖带是可能的。我一般20ul体系,质粒DNA浓度只需要0.05ng/ul 然后只取0.5-1ul。反应25-30个循环就很亮了。
这是我的
pcr产物
凝胶电泳图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
答:
出现
拖尾
是很正常的现象,毕竟基因组序列那么大,出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的,如果是其他的DNA作为模板,则有可能是你的模板不纯造成的,另外体系中有些物质,比如SDS也可能显示一些假带,造成判带困扰,所以你可以无视这种现象,只关心你的目的
条带
是否扩增出来即可 ...
问一下,就是,请问电泳DNA是否出现
拖尾
现象是要怎么判断的?
答:
1. PCR产物出现拖尾的因素有很多,总结为一条,
就是非特异性扩增过多
。原因可能是:(1) 模板不纯:解决方法,纯化模板 (2) Buffer不合适:解决方法,更换Buffer (3) 退火温度偏低:解决方法,适当提高退火温度 (4) 酶量过多:解决方法,适量用酶,或调换另一种酶 (5) dNTP、Mg2+浓度...
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