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pcr跑胶条带拖尾
PCR跑
出来的
条带
是这个样的,会不会是引物二聚体
答:
引物二聚体在溴芬蓝前面,通常
条带
较宽,不干脆,有
拖尾
。而
PCR
产物条带清晰干脆。据此即可判定是否为目的条带。
pcr
扩增反应板设置错误,怎么办
答:
若扩增产物条带大小与目的条带一致,说明有污染。更换新的 Mix、水或引物重复实验。反应体系在超净工作台内配制,减少气溶胶污染。空白对照条带的亮度比目的条带弱:可通过降低循环数使实验组目的条带扩出,而空白对照扩不出目的条带。 Q4 扩增产物
跑胶条带
弥散或
拖尾
制胶时要使胶完全融化。 检查人工...
为什么
PCR跑胶
的照片上一半白一半黑,上面DNA跑过的地方背景比较浅,DNA...
答:
DNA降解了,或者说你
PCR
的
条带
特异性不好,所以条带分布的范围较大。
用的pfu酶,按照说明书的步骤跑的
PCR
结果是这样的,请问是什么原因...
答:
首先一个问题是你的
胶
做得不好,这种情况其实很简单就可以解决,配方正确的基础上,只要融化的完全,冷却的完全,就可以避免,为什么大家都那么着急,很多人的marker都这个样子,不要急于一时。再有个你的目的
条带
如果是250左右那就问题不大,这次结果
拖尾
严重最主要是胶的问题。如果不是250左右,但是又...
ssr分子标记跑聚丙烯酰胺凝胶电泳后,泳道上有
拖尾
现象,这是什么原因...
答:
其实这个
拖尾
不算多严重,没有影响到数据统计和观察。如果你非常介意有拖尾现象,我感觉首先可以考虑一下减少上样量。然后
PCR
可以用Mix来做,引物终浓度不要太高,0.2uM也就够了,DNA模板也不要加太多,变性、退火、延伸时间也不要太长,15s-15s-30s也就够了。染色时甲醛也不要加太多。还有你的...
PCR
产物电泳,没有
条带
,但有
拖尾
,maker无拖尾
答:
模板可能有降解,建议避免反复冻融,放置时间不能太长。抽提RNA时有污染,包括基因组DNA污染和蛋白质污染,需重做抽提。提高退火温度,减少非特异性扩增。减少循环次数,减少非特异性扩增。电泳缓冲液时间太长,ph值和盐离子浓度明显改变。电泳时电压不能太高,8V/cm。一般来讲,基于promega和TaKaRa的
PCR
...
PCR
产物凝胶电泳不理想是怎么回事?
答:
建议与marker一起跑电泳,如果marker跑出的带是完整的,而模板DNA有
拖尾
、弥散等,就基本可以确定模板DNA降解了;如果marker跑出的带也是弥散的,那可能是琼脂糖质量不好,或者是电泳Buffer不好,建议换琼脂糖、重配Buffer。参考资料:www.genebase.cn ...
pcr
产物与Loading buffer没有混匀,后果是什么?会不会导致电泳时...
答:
博凌科为-为你解答:不应该啊,要是没混匀,怎么可能目的
条带
出来了,你再跑一遍混匀试试看看就知道是不是混匀的问题了
PCR
中DNA模板浓度过高会有什么影响
答:
有可能直接导致出不来
条带
,我前段时间就是因为浓度太高没出来条带
求救!
pcr
产物没有
条带
...
答:
其次检查
PCR
试剂,是不是有的试剂时间长或者污染了,变质了,失效了。特别是Taq和dNTP这两样,最容易出问题。PCR仪器也检查下,程序是否正常,样品台的温度控制是否准确,是否存在温度梯度。另外,做实验不要那么死板,胶的浓度随便做,你不就跑个胶看
条带
么?又不是
跑胶
分离。还加marker,虽然marker不...
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