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siRNA转染后什么时候做检测最好
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第1个回答 2015-06-09
36-48小时
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转染sirna后做
q-pcr 做出来结果没区别怎么办
答:
2.siRNA转染后什么时候做蛋白检测(如Western Blot)最好?在mRNA水平下降后,接下来才会有蛋白水平的下降,一般来说,
转染后48-72小时进行蛋白检测通常会得到较好的结果
EntransterTM-R4000是英格恩生物(Engreen Biosystem)最新研发合成的针对siRNA、microRNA、mimic、inhibitor、mRNA和shRNA等RNA的转染试剂。
siRNA转染后什么时候做检测最好
答:
36-48小时
sirna转染后
多长
时间
提rna
答:
三到五小时
。siRNA (Small interfering RNA),是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。SiRNA是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。
细胞增殖后
转染
的
sirna
会起作用吗
答:
siRNA
在细胞内是有一定时限的,因为RNA都有半衰期且不能进行复制扩增。在细胞增殖后,细胞内的siRNA不但会相对减少,还会被细胞降解掉。所以你
最好
在
转染后
24-72小时内进行实验。细胞增殖特别快的话,就接近于24小时收,细胞增殖慢的话,就可以稍微晚点收。
siRNA转染后
目的基因未被干扰,该怎么办
答:
1、转染效率的问题。虽然
siRNA
可以转入细胞内,但是由于转染效率低,进入细胞的siRNA太少,无法发挥正常功能。2、
检测时间
点。 建议
转染后
24-48 h检测基因水平变化,48-72 h检测蛋白水平变化。3、推荐RT-PCR的引物应该设计在target位置的两侧,而不是同侧。4、RNA降解,建议-20℃保存,溶解后要最小量...
观察细胞中蛋白的变化,要
转染后多久
能看出来
答:
观察细胞中蛋白的变化,要
转染后多久
能看出来 能抑制多长时间你需要自己
检测
。不同细胞、不同
siRNA
、不同转染试剂都会影响效率。但是假设你转染之后48小时或者72小时之后passage 细胞做MTT或者克隆形成实验,个人觉得是可以的(前提是你有48小时或72小时knockdown证据)。但是如果你knockdown效率不高的话,实验...
hepg2细胞
siRNA转染
条件?哪位大神指点一下。
答:
30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度
最好
做2个复孔,一般
做转染
前一天铺板,用来稀释
siRNA
和稀释转染试剂的培养基必须是无血清培养基,因为血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合,并且影响转染效率。
转染后
48h收细胞做qPCR基因水平
检测
或者转染后72h收细胞提蛋白做western Blotting蛋白水平检测。
原核生物转录组测序原代细胞核酸
转染
仪简介
答:
专利创新技术,其原理是采用独特的电场参数与细胞类型特异的转染溶液相结合的方法,直接将DNA转到细胞核内,即使是原代细胞(包括不分裂的血细胞或神经元),
转染后
2-4小时就能
检测
到转染基因的表达。2、转染效率高,操作简单方便。
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