hepg2细胞siRNA转染条件?哪位大神指点一下。

如题所述

之前我们用过Lipo,说明书上要求细胞的密度在70%左右,同时在转染后的4-6小时注意要换培养液,后来我们实验室换了RFect sRNA Transfection Reagent,细胞密度在45%左右 ,设置siRNA终浓度10nM,30nM,50nM,100nM四个梯度,每个梯度最好做2个复孔,一般做转染前一天铺板,用来稀释siRNA和稀释转染试剂的培养基必须是无血清培养基,因为血清的存在会干扰siRNA与转染试剂的混合,并且影响转染效率。转染后48h收细胞做qPCR基因水平检测或者转染后72h收细胞提蛋白做western Blotting蛋白水平检测。
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第1个回答  2018-12-29
hepg2比较难转 直接用lipo也可以 就是效率低一点 最高效的还是构建病毒载体侵染吧 电转的话效率也还行本回答被网友采纳
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