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pcr产物做二次pcr
pcr产物
测序的步骤?
答:
PCR产物
测序是一种常用的测定PCR扩增产物序列的方法,它可以用来确定特定DNA或RNA片段的序列。以下是PCR产物测序的一般步骤:1、准备PCR产物 进行PCR扩增,使用适当的引物扩增目标DNA或RNA片段。确保PCR反应充分进行,并获得足够数量的PCR产物。
2
、净化PCR产物 使用净化试剂盒将PCR产物从反应体系中净化。这将...
PCR的
问题
答:
1、
PCR产物
的电泳检测时间:一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚至消失。2、假阴性,不出现扩增条带 模板:模板中含有杂蛋白质,模板中含有Taq酶抑制剂,模板中蛋白质没有消化除净,特别是染色体中的组蛋白,在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。模板核酸变性不彻底。在酶...
PCR产物
问题
答:
模板是什么?基因组么?两次用的模板是一批做的么?时间长的话模板可能会降解
我的质粒
做PCR
,第一次很成功,但后来同样的试剂和条件就再也不成功了...
答:
这个?
PCR
太考验人品了。多做几遍吧
PCR产物
的检测方法有哪些?都有什么原理
答:
(2)加样和电泳 上下槽中加入1×TBE电泳缓冲液,溢过加样孔,拔出梳子,排出加样孔中的气泡,将
PCR产物
或限制性内切酶消化
产物2
与1上样缓冲液混匀,用微量注射器加入加样孔底部,使样品在孔底成一层,两侧孔中加入标准分子量的DNA Marker。以2-10V/cm电压电泳,电泳时间足够长,使片断足以分开,...
PCR
技术中为什么3次循环才能得到目的基因
答:
原因如下:1、第一个循环扩增出来的新片段很长很长。2、第二个循环以新的长片段为模板进行,但新片段的一端是引物开头的,所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度,但只是一条链,所以还不能分离出目的基因。3、第三个循环,当以第二个循环得到的新片段为模板时,因为这个片段的长度就是需要...
PCR产物
片段链接到T载体上后,PCR片段是否会出现两种连接方向
答:
PCR产物
片段链接到T载体上后,PCR片段是会出现两种连接方向。如果用1%的琼脂糖电泳30min,主带(超螺旋的闭环质粒dna)会在3kb-
2
kbmarker之间,如果是单酶切产物,则应该在3.5kb的marker附近。要连接到载体上,形成带有PCR目标片段的质粒,将这个质粒导入受体菌,才能检测这个片段的活性、作用等等。摘要...
在
PCR
技术中,循环四次后为什么会得到11条目的基因?是不是也算上了第二...
答:
公式:m=2^n-n-1 m为目的基因数,n为循环次数u
PCR
扩增
产物
拖尾、有二聚体可不可以继续做酶切
答:
将
产物
切胶回收纯化后完全可以。
pcr产物
的问题~高手进
答:
PCR
就是这样啦,我也遇到过这样的情况,找不到原因。你就静下心来,用pfu摸条件吧,退火温度,引物,循环数都做以下调整。pfu不如Taq好扩。祝楼主实验顺利啊!
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