88问答网
所有问题
当前搜索:
pcr产物做二次pcr
PCR
后的
产物
是单链还是双链
答:
当然是双链。(1)模板高温变性:双连解旋,形成两条单链。(2)低温退火:上下游引物分别与两条单链退火,碱基配对结合。(3)中温延伸:在高温聚合酶的参与下,利用dNTP,从引物最后的碱基开始,进行链的延长,最后形成双链。这是一个循环,N此循环后,也是这样,最终形成双链。
连接
产物
能直接
做pcr
吗
答:
能.因为你扩增是必需拿连接
产物做
模板,但是连接产物里既有载体片段,更多的是你的目的产物片段,无论连上与否,均可扩出你的目的片段.当你可以扩增出你的目的片段,但没有任何意义.也就是不能说明你的目的片段是否连到你的载体上.
做PCR
反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应?
答:
做PCR
反应为什么在循环结束后要有5min延伸反应 --- 这个问题比较好理解,因为在循环结束后,体系中的taq酶可能很多正处于复制状态,如果此时降到室温,将会影响最终产率。所以再留出5分钟,以使正在复制中的taq酶能够复制完全,以合成更多的目的分子。--- 看来可能我的表述不够清楚,那我稍微详细的...
我做的巢式
PCR
,第一幅图片是我想要的,可是后来成了第二幅图,求高手指点...
答:
如果引物什么的都有依据,体系没问题的话,那么肯定是是模板浓度过高。多稀释一轮
产物
,做个梯度,范围要广
PCR
引物设计怎么做 啊?跪求!
答:
引物A:模板G与引物G:模板A错配对PCR影响是等同的。9.引物的5′端 引物的5′端限定着
PCR产物
的长度,它对扩增特异性影响不大。因此,可以被修饰而不影响扩增的特异性。引物5′端修饰包括:加酶切位点;标记生物素、荧光、地高辛、Eu3+等;引入蛋白质结合DNA序列;引入突变位点、插入与缺失突变序列...
酶切后产物可以做
pcr产物
回收么
答:
如果没有其他杂带就可以。单一条带的
PCR产物
,如果酶切后也只有一条带,就可以用产物回收试剂盒回收。但如果酶切后有杂带或多条带,就只能做胶回收。
PCR
实验室污染了怎么处理?
答:
A. 实验室进行通风处理,至少
2
周的时间;通风可加速扩增
产物
的消散的速度 B. 使用清水对实验台面、实验室进行清洗;DNA不溶于酒精,使用清水多次擦拭后可消除附在实验台面等的核酸DNA;C. 使用紫外灯进行房间的照射;紫外线及产生的臭氧都有破坏DNA结构的作用 D. 之前使用的灭菌锅使用清水清洗多次,...
pcr
扩增
产物
数量与扩增的循环数n有关,那目的扩增产物数量是否就是2的n...
答:
不是,你自己画一下
PCR
流程图就知道了,即便不考虑线性扩增的那些
产物
,指数扩增的目标片段增长应该是2的(n-2)方,也就是说,头两个循环里没有目标产物生成
我想克隆一个基因。步骤是:先进行PCR,
PCR产物
纯化回收,然后连接,转化...
答:
你也是老手了,300bp的片段连接也是小意思,基本的问题就不谈了:1,不成功是怎么不成功,假阳性?如果是这样,多挑点(20个)鉴定 2,试试培养基中加1%葡萄糖,以及将片段末端磷酸化试试,都能提高连接和转化效率。我觉得,片段与载体比例不是根本原因,300bp很好连,而且是T载体,就算比例比较夸张...
如何将
PCR产物
用于生物系统进化研究
答:
比如说你通过
pcr
获得了一段某种鸟类的序列,将这段序列测序,然后把测序结果在genebank中和已知其他物种的序列比对,比对结果可以用来画各物种的系统进化树以及计算碱基替代率,计算在进化过程中收到的选择等等等等。
棣栭〉
<涓婁竴椤
8
9
10
11
13
14
15
16
17
涓嬩竴椤
12
灏鹃〉
其他人还搜