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pcr拖尾现象
如何消除
PCR
的
拖尾
答:
消除
PCR拖尾
的方法:1、纯化模板 2、更换Buffer 3、适当提高退火温度 4、适量用酶 5、适当降低dNTP和镁离子的浓度 6、减少循环次数 PCR拖尾产生的原因:1、模板不纯 2、Buffer不合适 3、退火温度偏低 4、酶量过多 5、dNTP、Mg 2*浓度偏高 6、循环次数过多 ...
为什么
pcr
的时候,DNA模板浓度高了,会有
拖尾
?
答:
因为
pcr
利用一种DNA聚合酶来延伸结合在待定序列模板上的引物。DNA模板纯度不纯的时候,会对
PCR
起抑制作用。PCR反应中,模板只要1ng就可以,所以模板浓度不要太高。直到掺入一种链终止核苷酸为止。每一次序列测定由一套四个单独的反应构成,每个反应含有所有四种脱氧核苷酸三磷酸(dNTP)。并混入限量的一种不...
质粒
pcr
条带
拖尾现象
严重,出现好几次,求解释
答:
拖尾在生物专业词汇叫做smear。造成此的原因有多种。一般来讲,有以下几点:1,引物设计不佳,造成了
拖尾现象
。2,
PCR
中DNA浓度加的太多,造成了拖尾。3,mg2+浓度加的太高,造成了拖尾。4,跑胶电压不合适,造成了拖尾。5,退火温度不合适,造成了拖尾。这些都可能造成拖尾,请认真分析之。谢谢。
跑胶弥散和
拖尾
各是什么
现象
答:
电泳出现
拖尾现象
,英文成为smear,就是弥散。其原因,主要从以下两个方面考虑: 1、
PCR
产物自身原因: 往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。 对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③...
PCR
产物跑电泳时发生
拖尾
,这是什么原因造成的?
答:
PCR
产物电泳
拖尾
,可能有如下原因: a.模板不纯。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.循环次数过多。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。d.减少循环次数
琼脂糖凝胶电泳
拖尾
了怎么办?
答:
跑过琼脂糖凝胶电泳的小伙伴,是不是经常遇到过电泳
拖尾
的
现象
啊?相信不少人点头如捣蒜了。提个质粒拖尾,提个DNA拖尾,连
PCR
也拖尾,拖尾什么的最常见了。验证也就算了,关键是图片拍出来不好看了,发文章什么的太影响档次了。下面我就跟据自己的经验跟大家讲讲琼脂糖凝胶电泳为什么会拖尾,有不足的...
为什么
pcr
的时候,DNA模板浓度高了,会有
拖尾
?
答:
DNA模板浓度高了,不仅会有
拖尾
,还可能会没有
PCR
条带。特别是在DNA模板纯度不纯的时候,会对PCR起抑制作用。PCR反应中,模板只要1ng就可以,所以模板浓度不要太高。
DNA琼脂糖凝胶电泳出现
拖尾
的原因是什么
答:
电泳出现
拖尾现象
,英文成为smear,就是弥散.其原因,主要从以下两个方面考虑:1、
PCR
产物自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多.对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶.②减少dNTP的浓度.③适当降低Mg2+浓度....
以质粒作为模板,
pcr
出现
拖尾现象
,为什么?
答:
没有具体描述,只能给出几个猜测.你先看看marker跑得好不好.marker也不好的话:1.跑胶时电压太高 2.染料问题 3.胶没做好 如果marker没有问题的话:1.loading buffer 可能有细菌污染 2.
pcr
问题
PCR
产物电泳时没有明显的条带,但有
拖尾
,maker无拖尾。反映体系如下...
答:
你的
PCR
反应体系中没有加MgCl2吗?Mg2+在PCR反应中发挥了重要作用,Mg2+浓度越高,Taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;Mg2+浓度过低则影响PCR扩增产量,甚至使PCR扩增失败而没有扩增条带。那个
拖尾
可能是引物二聚体
<涓婁竴椤
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