不一定。看你的需要了。
我给你写了一个比较典型的梯度,你可以看看
其中0-10min就算是个缓冲时间,色谱柱的死体积大约也就4-6min。这个时间可以有,也可以直接开始跑梯度。
真正开始梯度的是10-20min,这段时间里,有机相的比例是实时变化,也只有这一段是最有用的。
20-25min可有可无。如果你的样品中有一些难溶物,最好在这个时候用高浓度的有机相冲出来。
26-35min其实是平衡时间,回到0min时的有机相浓度,这样把基线跑平稳之后,可以马上开始下一针的分析。
时间(min) 有机相比例(%)
0 30
10 30
20 60
25 60
26 30
35 30