HPLC法中,等度与梯度洗脱有什么区别?两者分别适合怎样组分的分离?

阐述最好能具体点

1、洗脱的改变与不改变的配比不同

等度洗脱:流动相的组成比例和流速恒定不变。梯度洗脱:改变流动相的浓度配比。

2、它们的定义不同

等度洗脱定义:液相色谱操作中,等度洗脱即在样品组分的分析周期中,流动相的组成比例和流速恒定不变的洗脱方式。与梯度洗脱对应。

梯度洗脱定义:梯度洗脱又称为梯度淋洗或程序洗脱。在同一个分析周期中,按一定程度不断改变流动相的浓度配比,称为梯度洗脱。


扩展资料:

用梯度洗脱还是等度洗脱,主要看杂质的情况。同一物质有梯度洗脱和等度洗脱两种条件时,梯度洗脱的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好(不好的话就要用梯度洗脱)。

1、杂质和主成分极性相差很大,杂质一定要全部都能洗脱出来(有时等度情况下冲两三个小时杂质也冲出不来,就必须考虑用梯度)。

2、杂质和主成分极性相差较大,杂质出峰太晚(等度冲两个小时出来个杂质,就可以通过梯度缩短检样时间)

3、还有就是杂质极性比主峰的大,等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边,杂质分开主峰又出峰太晚,这种情况也得考虑梯度洗脱。

在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度,用梯度要麻烦一些。

洗脱要求:

1、洗脱液体积应足够大,一般要几十倍于床体积,从而使分离的各峰不致于太拥挤。

2、梯度的上限要足够高,使紧密吸附的物质能被洗脱下来。

3、梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

梯度洗脱可分为低压梯度(又称为外梯度)和高压梯度(又称为内梯度)。

(1)、低压梯度装置。低压梯度是采用比例调节阀,在常压下预先按一定的程序将溶剂混

合后,再用泵输入色谱柱系统,也称为泵前混合。

(2)、高压梯度装置。由两台(或多台)高压输液泵、梯度程序控制器(或计算机及接口板控

制)、混合器等部件所组成。两台(或多台)泵分别将两种(或多种)极性不同的溶剂输入混合

器,经充分混合后进入色谱柱系统。

参考资料来源:百度百科-等度洗脱

参考资料来源:百度百科-梯度洗脱

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第1个回答  推荐于2017-11-25
梯度洗脱:在同一个分析周期中,按一定程序不断改变流动相的浓度配比
等度洗脱则是指从头到尾只是用同一个流动相。
用不用梯度洗脱,主要看杂质的情况。同一物质有梯度和等度两种条件时,梯度的认可度较高。杂质与杂质、主峰、溶剂峰的分离度一定要好(不好的话就要用梯度)。
(1)杂质和主成分极性相差很大,杂质一定要全部都能洗脱出来(有时等度情况下从两三个小时杂质也冲出不来,就必须考虑等度)。
(2)杂质和主成分极性相差较大,杂质出峰太晚(等度冲两个小时出来个杂质,就可以通过梯度缩短检样时间)
(3)还有就是杂质极性比主峰的大,等度时要想主峰时间合适杂质全堆在前边,杂质分开主峰又出峰太晚,这种情况也得考虑梯度洗脱。

在能达到较好的分离度的情况下能用等度就用等度,毕竟用梯度要麻烦一些。
希望对你有帮助。本回答被网友采纳
第2个回答  2012-11-25
等度:流动相比例相同,换句话,在一次分析过程中使用一种流动相。
梯度:流动相比例、成分都可不相同
同时检测多种成分,各种成分可以使用不同比例的流动相,使用目的可以使样品目标成分分离效果更好,或缩短分析检测时间等。如农残检测
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