转基因得到了转化苗,做PCR质粒阴性对照都没问题,T1代没有目的片段,回头再检测T0代也没有目的片段咋整

T0代第一次做的时候,质粒是阳性的,样品有3个在目的片段那也出现了条带,但很暗,后来再做实验,那两个很暗的条带也没有了,而且每次都会出现非特异性条带也就是二聚体,是怎么回事?

首先是你确定把目的基因连进载体了么? 然后就是你怎么确定那是非特异性条带 和目的基因大小差别很大么 如果不是太大你就应该回收下来拿去测序看看 一般验证你基因是否转进去了应该用real time更好追问

确定连进载体了,二聚体在100bp,目的基因在750bp,差异很大!现在的问题是当初PCR T0代是阳性的,现在却跑不出来目标片段了

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