基因工程:如何确定转基因苗。请高手帮忙解答一下,我只知道主要是要运用到PCR技术的。

假设通过基因枪轰击技术,获得一株具有抗旱目的性状的转基因水稻,但出现了此转基因水稻株高比非转基因对照水稻变矮。
问题:
1、如何确认此苗是转基因苗?
2、目的基因是否表达?表达量如何?
3、株高变矮可能是什么原因?

是不是转基因植株,得看最初的转化苗是用什么方法筛选出来的。关于目的基因的表达,首先得明确目的基因的表达机制,即在哪个时间段会表达,比如干旱诱导时表达,或者恒定表达;其次选择在目的基因大量表达的时间段用PCR鉴定其表达,用正常植株做对照,普通PCR也可以,但real-time PCR效果回好一些。目的基因表达量高的植株很可能是转基因植株,更严格一点的话还需要其他方面的验证。植株变矮可能的原因有:一是目的基因本身会影响植株高低,二是目的基因的导入影响了控制植株高低的基因,最后就是还有其他一些不确定的因素造成的。
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第1个回答  2010-12-10
建议对植物的组织液做个PCR,跑个胶看看,有条带说明基因肯定是导入了。但是表达量的确定不太好判断,您是导入的质粒还是DNA片段,片段的话有可能插入植物基因组之后受抑制,要是质粒的话可以尝试将植物组织捣碎,离心,分出上清和沉淀,跑个SDS-PAGE,根据你要的蛋白的大小对照你的MAKER和条带的明暗来判断你要的蛋白是否表达,表达量怎么样,不知道植物有没有什么诱导质粒表达的机制,有的话最好用一下,否则表达量太少条带看不清。您的第三个问题我就不懂了,不是学植物学的,我学分子的,1,2两个问题都是根据分子生物学中一般的方法解决的,希望有用。
PS,有用的话追个分啥的,打字不易。本回答被提问者和网友采纳
第2个回答  2010-12-11
1,确定通过检查受体细胞是否具有外来基因来判断受体细胞是否获得了目的基因.
2,目的基因不好接检查,一般通过蛋白质的表达来检查。也就是形状的表达。
3,可能是你转入的目的基因影响到了,其他形状的表达
第3个回答  2012-03-12
那答案是什么??
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