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PCR产物电泳条带拖尾marker也有拖尾,但条带较亮现象的原因有哪些?
如题所述
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推荐答案 2019-07-26
你的PCR反应体系中没有加MgCl2吗?Mg2+在PCR反应中发挥了重要作用,Mg2+浓度越高,Taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;Mg2+浓度过低则影响
PCR扩增
产量,甚至使PCR扩增失败而没有扩增条带。那个拖尾可能是
引物二聚体
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PCR产物
跑
电泳
时发生
拖尾,
这是什么
原因
造成的
答:
你的
pcr
反应体系中没有加mgcl2吗?mg2+在pcr反应中发挥了重要作用,mg2+浓度越高,taq酶活性越强,条带越亮,但非特异性也较强,杂带越多;mg2+浓度过低则影响pcr扩增产量,甚至使pcr扩增失败而没有扩增条带。那个拖尾可能是引物二聚体
PCR产物
跑
电泳
时发生
拖尾,
这是什么
原因
造成
的?
答:
PCR产物电泳拖尾,
可能有如下原因: a.模板不纯
。b.退火温度偏低。c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高。d.循环次数过多。解决办法:a.纯化模板。b.适当提高退火温度。c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度。d.减少循环次数
这是我的
pcr产物
凝胶
电泳
图,哪位大神可以解答一下,为什么会出现前后拖 ...
答:
正常现象
,没必要大惊小怪,你如果是用基因组作为模板的话,出现拖尾是很正常的现象,毕竟基因组序列那么大,出现一些与引物部分序列互补的序列区间也是可能的,如果是其他的DNA作为模板,则有可能是你的模板不纯造成的,另外体系中有些物质,比如SDS也可能显示一些假带,造成判带困扰,所以你可以无视这...
哪位高人看过
PCR
跑
电泳
跑成这个样子
的?
这是什么
原因
造成的?望指教...
答:
如果按上述方法后marker不拖尾,但样品还拖尾,就是pcr的问题,
最大的可能是模板两过高(但从你的图中看
,你向后拖尾呈彗尾状,而不是呈等宽涂抹状,我觉得还是电泳问题,模板过高的可能小)。解决办法,把模板稀释100-1000倍,你的带挺亮的,应该好p。若有疑问,欢迎继续讨论,纯属手打,欢迎采纳,...
pcr产物
在
电泳
仪中跑胶出现
拖尾现象
是怎么回事
答:
有一下几种可能性:
PCR
扩增产物浓度很高,overloading造成的拖带 模板量加太多了 引物或者模板
的原因,条带
扩增的时候带入了很多杂带
电泳
DNA时
,拖尾现象
很严重,造成这种
现象的原因有哪些?
答:
电泳出现
拖尾现象
,英文成为smear,就是弥散。其
原因,
主要从以下两个方面考虑:1、
PCR产物
自身原因:往往由于酶量过多或酶的质量差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多,而造成PCR的非特异性产物 过多。对策:①减少Taq酶的量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。③适当降低...
pcr产物
跑的
电泳,
为什么DNA都有
拖尾
答:
PCR产物电泳拖尾,可能有如下原因:
a.模板不纯
.b.退火温度偏低.c.酶量过多,dNTP、Mg2+浓度偏高.d.循环次数过多.解决办法:a.纯化模板.b.适当提高退火温度.c.降低酶量,适当降低dNTP和镁离子的浓度.d.减少循环次数
pcr产物
200bp左右
但是条带亮
成一坨
答:
1 可能存在多个产物 2
条带亮
成一坨可能是由于多个产物重叠在一起形成的,也可能是由于非特异性扩增产生的
,也有
可能是电泳条件不合适所导致的 3 在分析
PCR产物
时,可以尝试进行聚丙烯酰胺凝胶
电泳,
以分离不同大小的DNA片段;同时也要注意扩增反应体系的优化和电泳条件的调整,避免非特异性扩增和电泳条件...
大家正在搜
电泳marker条带对应的大小
dna电泳marker条带
dna电泳marker条带歪斜
电泳marker条带
电泳marker为什么能指示条带
5000的marker条带
1000的marker条带
dna电泳marker
电泳marker
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pcr产物跑的电泳,为什么DNA都有拖尾