配的分离胶多加了tris-hcl对跑胶有什么影响

如题所述

在配制分离胶时,如果多加了Tris-HCl,可能会对跑胶产生以下影响:

    缓冲能力:Tris-HCl是缓冲液,其目的是维持pH的稳定。多加Tris-HCl会使缓冲能力增强,有助于维持pH的稳定,这可能对某些实验有利。然而,过多的Tris-HCl可能会影响某些实验的结果,例如可能会影响蛋白质的稳定性或活性。

    离子强度:多加Tris-HCl可能会增加溶液的离子强度,这可能会影响电泳的效率。高离子强度的溶液可能会降低离子的移动速度,从而影响电泳的效果。

    蛋白质稳定性:Tris-HCl的pH值可能会影响蛋白质的稳定性。过高的pH值可能会使蛋白质不稳定,从而影响电泳的效果。

    电极保护:Tris-HCl是一种弱碱性的物质,可以保护电极免受腐蚀。然而,过多的Tris-HCl可能会影响电极的功能,从而影响电泳的效果。

因此,在配制分离胶时,应严格按照配方进行配制,避免加入过多的Tris-HCl。如果多加了Tris-HCl,可以重新配制分离胶,以确保实验结果的准确性。

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第1个回答  2017-05-30
在SDS-PAGE不连续电泳中,制胶缓冲液使用的是Tris-HCL缓冲系统,浓缩胶是pH6.7,分离胶pH8.9;而电泳缓冲液使用的Tris-甘氨酸缓冲系统。在浓缩胶中,其pH环境呈弱酸性,因此甘氨酸解离很少,其在电场的作用下,泳动效率低;而CL离子却很高,两者之间形成导电性较低的区带,蛋白分子就介于二者之间泳动。由于导电性与电场强度成反比,这一区带便形成了较高的电压剃度,压着蛋白质分子聚集到一起,浓缩为一狭窄的区带。当样品进入分离胶后,由于胶中pH的增加,呈碱性,甘氨酸大量解离,泳动速率增加,直接紧随氯离子之后,同时由于分离胶孔径的缩小,在电场的作用下,蛋白分子根据其固有的带电性和分子大小进行分离。本回答被提问者采纳
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