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配制western 胶的水需要高压吗,高压后的水对胶的质量有影响吗?谢谢
如题所述
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第1个回答 2017-06-20
一种高压水喷头管胶的固定装置,涉及一种用于通过高压水泵将储水罐中的水经过高压胶管对下水管网内进行疏 通时的高压活动软管的固定装置。其特征在于其结构包括:操作杆
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做
western
处理蛋白时煮过头了会蛋白降解
吗?
答:
煮沸时间不够使得蛋白质变性不充分或者形成二聚体会导致实验效果不好,煮过头的情况我也没有遇到过(貌似还没有碰到人煮个5-10分钟还会煮成一小时的- -|||),不过肯定的是变性已经充分。可以试一试,当然也有可能蛋白质长时间高温沸水作用下部分降解。
凝胶迁移实验(EMSA) 的原理及实验方案详解
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b. 按照如下配方配制20ml 4%的聚丙烯酰胺凝胶(注意:使用29:1等不同比例的Acr/Bis对结果
影响
不大)。 注意:此实验中需去除SDS变性剂 c. 按照上述顺序依次加入各种试剂,加入TEMED前先混匀,加入TEMED后立即混匀,并马上加入到制胶的模具中。避免产生气泡,并加上梳齿。如果发现非常容易形成气泡,可以把一块制胶的玻...
急切求解WB,IHC的意思!
答:
所以要求在进行IHC染色时,需要先进行抗原修复或暴露,即将固定时分子之间所形成的交联破坏,而恢复抗原的原有空间形态。 常用的抗原修复方法有微波修复法
,高压
加热法,酶消化法,水煮加热法等,常用的修复液是pH6.0的0.01 mol/L的柠檬酸盐缓冲液。 免疫组化常用的染色方法有哪些? 根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫...
跑
western
时不同浓度的分离胶对跑蛋白
的影响
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有影响,
但是如果其他配置完全一样,就是胶浓度变化了的话,上述原因是需要考虑的。
DNA和RNA提取原理是什么?还有相关试剂盒的原理,各步的作用~~
答:
3. RNA在TRIzol试剂中时不会被RNase污染,但提取后继续处理过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4小时,塑料制品可在0.5M NaOH中浸泡10分钟,然后用水彻底清洗
,高压
灭菌,即可去除RNase。4. 配制溶液应使用无RNase的水(将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.01℅v/v,放置...
琼脂糖的电泳技术
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电泳缓冲液一般都配制成浓的贮备液,临用时稀释到所需倍数。TAE缓冲能力较低,后两者有足够高的缓冲能力,因此更常用。TBE浓溶液长期贮存会出现沉淀,为避免此缺点,室温下贮存5×溶液,用时稀释10倍0.5×工作溶液即能提供足够缓冲能力。(3)凝胶的制备以稀释的电极缓冲液为溶剂,用沸水浴或微波炉配制一定浓度的溶胶,灌...
...做
western
blot 跑胶时,用多大浓度的
胶,
蛋白每孔上样量是多少?_百...
答:
一般恒压140V跑。而且你的蛋白很浅应该不一定是跟胶有关,很多因素啊。也许你的抗体不是很好用(很细我不知道你什么意思,一般都是呈带状),或者你上的蛋白太少了,一般我都是30~50ug,就差不多了。我看过了 你的蛋白才6ug,太少了 至少要30ug,你的裂解液少加点,或者细胞种多点 ...
Western
blot法的Westernblot法应用
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这一技术的灵敏度能达到标准的固相放射免疫分析的水平而又无需像免疫沉淀法那样必须对靶蛋白进行放射性标记。因此要对非放射性标记蛋白组成的复杂混合物中的某些特定蛋白进行鉴别和定量时
,Western
blot法极为有用。此外,由于蛋白质的电泳分离几乎总在变性条件下进行,因此溶解、聚集以及靶蛋白与外来蛋白的共...
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