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sirna效率
siRNA
转染
效率
不理想的原因(1)
答:
调整细胞密度到转染时汇合度为20-40%。成功转染
siRNA的
细胞会产生目标基因表达下调,但未成功转染的细胞却不受影响,这时转染
效率
和总的细胞数量就很重要,一般细胞数量较少时转染效率高。由于siRNA沉默时效性的影响,转染后48小时才能进行进行qRT-PCR检测,转染后48-72小时才能进行蛋白检测。如果转染时铺板...
小胶质细胞转染
sirna 效率
高吗
答:
三到五小时。
siRNA
(Small interfering RNA),是一种小RNA分子(~21-25核苷酸),由Dicer(RNAase Ⅲ家族中对双链RNA具有特异性的酶)加工而成。
SiRNA
是siRISC的主要成员,激发与之互补的目标mRNA的沉默。
不同细胞
siRNA
转染
效率
的检测问题
答:
1.通常情况下悬浮细胞转染
效率
较低,贴壁细胞的转染效率因细胞不同,有些很高有些很低。HepG2的DNA转染效率大概有50%,
siRNA
暂时没做过。如 果你有GFP质粒和针对GFP的siRNA共转染,用只转染GFP质粒的孔做对照,可以看出转染效率。如果没有针对GFP的siRNA就只能转染GFP质 粒,一般情况下转染DNA好的话...
沉默
效率
怎么计算
答:
沉默
效率
计算方法:1、一种预测
sirna
沉默效率的方法,其特征在于:在输入层设置特征提取模块对数据集进行特征提取和处理,使用词向量预训练模型获得序列词向量,并结合循环神经网络提取序列的潜在特征,再利用逻辑回归模块计算得到sirna沉默效率的预测结果。2、根据权利要求1所述预测sirna沉默效率的方法,其特征...
细胞污染会影响
sirna
转染
效率
吗
答:
siRNA
在细胞内是有一定时限的,因为RNA都有半衰期且不能进行复制扩增。在细胞增殖后,细胞内的siRNA不但会相对减少,还会被细胞降解掉。所以你最好在转染后24-72小时内进行实验。细胞增殖特别快的话,就接近于24小时收,细胞增殖慢的话,就可以稍微晚点收。
小胶质细胞 转染
sirna 效率
高吗
答:
做
SiRNA
质粒转染
效率
低转染细胞状态差 实验室直都用型质粒抽提试剂盒转染细胞没问题 我觉要注意2点:1注意肠杆菌(Escherichia coli)本身污染收集菌体沉淀防止菌液散落经用75%乙醇擦拭手套 2洗脱使用内毒素水我用注射用水 论提提我都用型并没刻意用转染级转染量内毒素操作太麻烦损失太 ...
干货分享 |
siRNA
转染实验(上)
答:
转染前,细胞融合率的理想范围应在30%至60%,过高或过低可能影响转染效果。同时,通过设置荧光标记的
siRNA
阴性对照,可以更准确地评估转染
效率
,确保实验的可靠性和可重复性。结论与建议 siRNA转染实验需要细致的操作和精确的参数调控。通过理解RNAi的基本原理,优化储存和溶解步骤,以及选择和调整转染条件,...
shrna敲低
效率
要达到多少呢
答:
最低可以达到50%
siRNA
序列是与mRNA目的序列完全互补结合的,所以是降解;当不完全互补时才是抑制翻译,miRNA大部分是这样的。
求助做
SiRNA
质粒转染,
效率
低转染后细胞状态差
答:
做
SiRNA
质粒转染,
效率
低转染后细胞状态差 实验室一直都是用日常型质粒抽提试剂盒,转染细胞没问题。我觉得只要是注意以下2点就可以了:1,注意大肠杆菌(Escherichia coli)本身的污染,收集菌体沉淀时防止菌液散落,经常用75%的乙醇擦拭手套。2,最后洗脱时最好使用无内毒素的水,我们是用注射用水的。无...
sirna
nc怎么设计-如何设计有效的
siRNA
答:
转染
效率
的确定,常用的是使用荧光标记的siRNA,通过荧光显微镜,共聚焦显微镜,流式细胞仪检测的方法。具体可以参考我们的产品说明书。 Q:细胞的转染效率是否与siRNA序列相关? A:转染效率的高低取决于与细胞自身及转染方法,而于
siRNA的
序列并没有直接关系。因此,siRNA在不同的细胞转染效率可能不一样。 Q:转染siRNA时候的...
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