质粒转染细胞多长时间提取蛋白

如题所述

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第1个回答 2016-03-03

需要根据具体情况进行具体分析，推荐从以下角度进行分析：

对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计，分别取样然后做SDS-PAGE\WB分析；

参考实验室经验数据；

尝试采用磁珠IP试剂盒产品（义翘有相关产品）进行小量样品的快速纯化；

…

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瞬转后想验证一下质粒,一般转染多久可以提答：回答：24h到48h~一般48h蛋白表达量会达到峰值~但需要根据具体细胞来定~

质粒过表达转进去效率能维持多久答：质粒过表达转进去效率能维持48h。做最长的大概是转染后48h传代24后收蛋白72h都很少一般48h，根据经验不超过7天，维持一定量，要记得质粒是不能在真核复制的而且还会降解随着细胞分别质粒会慢慢消解。

质粒转染细胞后多久能提RNA做PCR(转染细胞,质答：24h-48h~最好不要超过48h~转入的质粒会逐渐消失~

可以往一个细胞内转染两次吗答：这个可以的如果是用Lipofectamine 2000，可以先转siRNA，等24h后再转表达蛋白的质粒一般siRNA可以72h，蛋白48h足够了，这样时间比较好而且siRNA转染细胞要求密度不太高，这样长得第二天正好转表达蛋白质质粒

细胞培养及转染Protocol答：然后将上述混合物均匀的加入到细胞中。(4) 在37℃，5％CO2，100%饱和湿度中保温6小时，每个培养皿各加入12ml新鲜含10%FBS的DMEM培养液，继续培养。24小时后用新鲜含10%FBS的DMEM培养液替换原先的旧培养基，继续培养。转染24h后可提RNA，转染48小时后可提蛋白和RNA。293T细胞培养及转染Protocol ...

质粒瞬时转染细胞后多久可以提rna答：一般为24-48小时。建议你做个rt－pcr时间梯度，检测下哪个时间收rna效果最好。

质粒转染细胞多长时间提取蛋白答：需要根据具体情况进行具体分析，推荐从以下角度进行分析：对细胞表达目的蛋白的时间进行梯度设计，分别取样然后做SDS-PAGE\WB分析；参考实验室经验数据；尝试采用磁珠IP试剂盒产品（义翘有相关产品）进行小量样品的快速纯化；…

细胞一般转染后多久能收细胞做western blot答：回答：转染的质粒和promoter不同,细胞表达的时间也不尽相同。一般在24-48小时之间。你第一次做的话,就勤快点常观察。

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