瞬转后想验证一下质粒，一般转染多久可以提

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第1个回答 2018-03-27

24h到48h~一般48h蛋白表达量会达到峰值~但需要根据具体细胞来定~

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细胞瞬转再传代加药,这样可以吗?传代后质粒会不会减少?答：如果你是第一次瞬转某个质粒，第一次要检测某个蛋白，可以先做一次预实验，看在什么时间段蛋白的表达最高。根据细胞生长状态和密度可以进行传代再加药。培养时间长一般都有质粒丢失的情况，我们一般是在转染后72小时内就进行加药处理，因为转染时细胞密度有控制，一般不传代。

瞬转是等细胞长满再收吗答：是。稳转时24-48小时之间稀释传代，瞬转时48小时后收细胞，细胞都会长的满满的。瞬转即瞬时转染，是指将外源质粒通过某种方式导入到细胞内得以表达；稳转即病毒感染，是利用慢病毒将外源插入整合到宿主细胞的基因组。

转染是什么意思答：1、瞬时转染是指外源DNA或者RNA不整合到宿主染色体中，因此一个宿主细胞中可存在多个拷贝数，产生高水平的表达，但通常只持续几天，多用于启动子和其它调控元件的分析。一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。2...

做瞬转可以复苏细胞的时候直接加质粒吗答：不可以，转染是通过物理或化学方法将外源DNA转入细胞的过程，磷酸钙转染法和脂质体转染法为例，两种方法都需要在转染24h前进行细胞传代，且细胞密度达到60ml培养皿的60%-70%方可进行转染实验。而细胞复苏后，细胞未达到最佳的状态，活力为完全恢复，细胞密度未达到要求，故而不可用复苏细胞直接加质粒进行实验...

我要做脂质体转染到3T3-L1细胞看是否质粒会表达。但是3T3-L1买来是...答：步骤网上一大把。我用过lipofectimin2000和vigrous的，步骤都可以再网上查到的。你转染后也要分为瞬时转染和稳定转染的。稳定转染需要用抗性进行筛选，希望转染的质粒和基因组进行重组结合。瞬时转染的话，大概在48小时的样子，效果会比较好，不过这个不同的细胞是不一样的，需要你自己摸索下了。

质粒转染的blank中加质粒吗答：一般来说，超螺旋质粒DNA转染效率较高，在转染后24-72小时内（依赖于各种不同的构建）分析结果，常常用到一些报告系统如荧光蛋白，β半乳糖苷酶等来帮助检测。后者也称稳定转染，外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体（episome）存在。尽管线性DNA比超螺旋DNA转入量低但整合率高。外源...

怎样检测转染对细胞增殖是否有影响答：我现在想做瞬转，然后24，48，72小时后检测转染的载体对细胞增殖的影响.我所转染的是连有目的片段的PCDNA3.1载体，这种载体是不带荧光的.请问各位大侠，我该用什么方法来检测我的转染是否成功呢?DXY721认为检测转染成功与否的方法很多，流式，RT-PCR，WB应该都可以 eastICEbird建议是不是可以和有...

转染是什么意思答：为了提高转染效率，通常使用超螺旋质粒DNA，这是一种紧密的质粒形态，可以更好地进入宿主细胞。在转染后24-72小时内，可以通过报告系统如荧光蛋白、β半乳糖苷酶等来检测基因表达的水平。2、稳定转染稳定转染是指外源DNA既可以整合到宿主染色体中，也可能作为一种游离体存在。在稳定转染中，外源DNA的整合...

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