已知柠檬酸-柠檬酸钠缓冲溶液pH公式为pH=pKa2+lg([柠檬酸钠]/[柠檬酸]),查表柠檬酸PKa2=4.76,要配置pH=4.8的缓冲液,所以4.8=4.76+lg([柠檬酸钠]/[柠檬酸]),即lg([柠檬酸钠]/[柠檬酸])=0.04。
柠檬酸钠与柠檬酸的物质量之比为1.0965,另外把所需要的缓冲液浓度(比如1mol/L)先设为Xmol/L带入:即取用柠檬酸为192Xg,柠檬酸钠为(294*1.0965*X)g。
假设配制一升0.05M 柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液
pH = pKa2 + Log[摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)]
4.5= 4。76 + Log[摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)]
那么
(1)[摩尔(NaH2Cit)/摩尔(Na2HCit)]=10^0.26
又,
(2)摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)= 1 x 0.05 = 0.05 摩尔
解联立方程组(1)和(2)可求出所需的:
摩尔(Na2HCit)/摩尔(NaH2Cit)
再乘以它们的分子量就得到所需的重量了。
扩展资料:
柠檬酸盐缓冲液在医学词汇中还缩写为CPBS,PH=5.5,常用于免疫分析,如ELISA法,主要成分为柠檬酸和磷酸氢钠。
在生化研究工作中,常常需要使用缓冲溶液来维持实验体系的酸碱度。研究工作的溶液体系pH值的变化往往直接影响到研究工作的成效。如果“提取酶”实验体系的pH值变动或大幅度变动,酶活性就会下降甚至完全丧失。所以配制缓冲溶液是一个不可或缺的关键步骤。
参考资料来源:百度百科-柠檬酸盐缓冲液
柠檬酸PKa2=4.76,而要配制pH=4.8的缓冲液
所以4.8=4.76+lg([柠檬酸钠]/[柠檬酸]),即lg([柠檬酸钠]/[柠檬酸])=0.04
例如:在800ml水中溶解175.3g NaCl和88.2g柠檬酸钠,加入数滴1mol/lHCl溶液调节 pH值至7.0,加水定容至1L,分装后高压灭菌。
SSC是分子生物学上最为标准的印迹及分子杂交处理液,20*SSC用于杂交实验变性及清洗常用浓缩型缓冲液。
无水柠檬酸的浓度与PH值有着密切的联系。柠檬酸是一种较强的有机酸,有3个H+可以电离。它的电离常数为:pk1=3.13;pk2= 4.76;pk3= 6.40。从电离常数来看,柠檬酸酸性比较强。最多的是氢离子,而不同的PH值直接影响无水柠檬酸电离后的主要存在形式。以下化学式,依次为一、二、三级电离。
H3Cit==H+ + H2Cit- pk1=3.13
H2Cit-==H+ HCit2- pk2= 4.76
HCit2-==H+ + Cit3- pk3= 6.40
在化学镀镍操作的pH值条件下,绝大部分柠檬酸都已电离成三价的柠檬酸根离子。
参考资料来源:百度百科-ssc (柠檬酸钠缓冲液)
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