tris在做质粒dna的提取时是什么作用

如题所述

Tris在做质粒DNA提取时的作用主要体现在以下几个方面:

    维持pH稳定:Tris缓冲液能够维持反应体系的稳定性,防止pH值的波动对DNA造成损伤。在质粒DNA提取过程中,细胞裂解、蛋白质去除和DNA沉淀等步骤都可能导致pH值的变化,而Tris缓冲液的存在可以有效地中和这些影响,保持pH值的稳定。

    防止酶降解:Tris缓冲液可以保护DNA免受核酸酶的降解。在质粒DNA提取过程中,可能会存在残留的核酸酶,这些酶会降解DNA,导致提取失败。Tris缓冲液中的成分可以有效地抑制核酸酶的活性,保护DNA的完整性。

    增加细胞壁通透性:Tris可以增加细胞壁的通透性,有助于细胞裂解和质粒DNA的释放。在质粒DNA提取过程中,需要通过裂解细胞来释放质粒DNA,而细胞壁的通透性是影响裂解效率的关键因素之一。Tris可以改变细胞壁的通透性,使得裂解液更容易进入细胞内部,提高质粒DNA的提取效率。

    作为DNA提取缓冲液的主要成分:Tris是DNA提取缓冲液的主要成分之一,可以提供适宜的环境和条件,保证质粒DNA的稳定性和提取效率。

综上所述,Tris在做质粒DNA提取时的作用是多方面的,包括维持pH稳定、防止酶降解、增加细胞壁通透性以及作为DNA提取缓冲液的主要成分等。这些作用共同保证了质粒DNA提取的成功率和效率。

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第1个回答  2016-06-12
由于Tris缓冲液为弱碱性溶液,DNA在这样的溶液中会被去质子化,从而提高其溶解性。本回答被提问者采纳
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