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pcr结果跑出来目的条带很亮但是目的条带下有很多拖尾已经加过dmso提高引物的特异性
如题所述
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推荐答案 2015-04-08
ç¹å¼æ§é¤äºæ·»å dmsoï¼ååºæ¸©åº¦å¯ä»¥æé«ï¼ååºå¾ªç¯æ°å¯ä»¥åå°ï¼å¼ç©å模æ¿çéå¯ä»¥åå°ã
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基因组DNA做
PCR
时,最下面
很亮的
带是什么啊
答：
建议你加DMSO跑，
提高退火温度 应该可以排除二聚体和RNA的可能delia1013
(站内联系TA)就是引物二聚体啊，我拿酵母cDNA批的时候也这样，目的条带比较淡，下面最亮的就是引物聚合了，不用管啦~~切你的带就可以啦~~heismeng(站内联系TA)dimerzhuifeng7000(站内联系TA)最下面的肯定是引物二聚体，...
基因组
PCR
扩增不
出目的条带
,只有两条
很亮的
杂带是怎么一回事_百度知 ...
答：
两个方法：
1、换酶，用高保真酶进行扩增
；2、在已有体系里面加入1%-5%不等的DMSO；可以试试看。
pcr
后跑电泳
条带很
长一截!
答：
你的引物没有将你的目的片段扩增出来
。建议你分析一下你的目的片段，是不是在某些区域有较高的GC含量。如果是，可以加DMSO再次进行扩增。
pcr
产物跑胶
条带
不清楚,有一点扩开。是primer有问题吗,还是模板量不够...
答：
楼上说的很好了 我补充一下： 1）cDNA中GC含量，一般GC含量过高的cDNA很难
PCR
如果不行你可以加入某些添加剂，例如
DMSO
或者甜菜碱 2）另外巢式PCR应该也很适合解决你的问题 没有了
PCR
反应中如何改变试验条件排除
特异
性
条带
?
答：
1 提高退火温度 2 重新设计引物，
提高特异
性 4 反应体系中加少量
DMSO
3 使用高保真DNA聚合酶
PCR
扩不
出来
,紧急求助
答：
我认为,“溴酚蓝带(约300bp)前后各有一条带,且两条带亮度差不多”,而“阴性对照(没加模板)只在溴酚蓝带后有一条带”。可以用实验组和阴性对照组比较,若两者溴酚蓝带后的带位置一直,那么应该是引物二聚体。 至于
PCR
,应从很多方面考虑,我有一个优化的方法: PCR必需具备下述基本条件:模板核酸(DNA或RNA)、...
在做
PCR
时,出现
引物
二聚体
答：
6. 所配MIX中加5%的甘油或者5%的
DMSO
，可以增强特异性；7.
PCR
反应体系的配制在冰上进行，最后加TAq酶，PCR结束后，产物勿放置在室温下过长时间，有人认为室温下有些TAQ酶会将多余的引物合成为二聚体；8. 增加循环数；9. 降低退火温度后有条带，则应逐渐提高温度，若提高温度的同时产物量减少，...
我自己设计
引物
,每次
PCR结果条带
大小都不一样,还有时候有有时候没有...
答：
在已经构建好的质粒上P条带，如果有非特异性扩增：1.提高退火温度，或者
加DMSO
2.引物设计有问题，与载体的全序列做一下BLAST 3.模板问题，有些模板如果是高GC含量等原因，很难P
大家正在搜
pcr目的条带上方还有条带
pcr跑不出目的条带
pcr目的条带很淡的原因
pcr产物比目的条带大的原因
pcr扩不出目的条带
pcr产物无目的条带
pcr电泳目的条带浅
三段pcr融合之后目的条带
怎样看pcr条带结果
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