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PCR跑不出条带是什么原因
如题所述
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推荐答案 2017-01-09
先解决阳性对照再考虑你的目的基因。
阳性对照都没有的可能性有两种,阳性对照模板有问题,pcr体系的问题(包括引物的问题)。
看你的内参下面没有引物二聚体,那后面泳道里最下面的那一道就是引物二聚体了。
pcr失败的原因太多了,
试剂有问题,
或者条件有问题,
第一次用一个引物,建议做梯度
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其他回答
第1个回答 2023-06-02
可能是引物设计不合理,也有可能DNA模板不可用,最后反应体系可能不合适
相似回答
质粒转化后菌液
pcr
没有
条带
答:
1、质粒质量问题:质粒存在降解或者损伤的情况
,导致质粒无法被扩增。这是由于
储存条件不佳或者质粒受到了不良处理的原因
。2、
引物或PCR条件问题
:PCR反应中使用的引物与目标序列不匹配,导致无法扩增出目标序列。此外,PCR反应的条件(如温度、时间等)也会不适合扩增目标序列。
【求助/交流】
PCR
扩增后没有
条带是怎么回事
?
答:
引物:引物质量
、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。
有些批号的引物合成质量有问题
,两条引物一条浓度 高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成单 位。②引物的浓度不仅要看OD值,更要注重引物原液做琼脂糖凝胶...
PCR
扩增后没有
条带是怎么回事
答:
有时还有必要用标准的温度计,检测一下扩增仪或水溶锅内的变性、退火和延伸温度
,这也是PCR失败的原因之一。
靶序列变异
:如靶序列发生突变或缺失,影响
引物
与模板特异性结合,或因靶序列某段缺失使引物与模板失去互补序列,其PCR扩增是不会成功的。
...目的
条带
没有一
条跑出来
。
什么原因
。求帮忙
答:
原因有很多,
1,PCR出了问题
,2,跑胶的缓冲液出了问题 3,MARK溶液中的DNA被降解了 4,操作时间太长,DNA被降解
pcr
检测跑胶时,为
什么
mark很漂亮,可是样品
条带
没有呢
答:
原因可能主要有:(1)PCR产物没有扩增条带,这个原因就包括
引物
、反应条件、模板等等了 (2)marker选择不合适;(3)点样漏了等等
PCR
结果没有
条带
,都是弥散的,这是为
什么
答:
1,可能是模板量过高,降低模板浓度10-1000倍;2,适当提高退火温度1-3度,或者先用高于你以往退火温度的1-3度先p上5个循环,再用先前温度p剩余的循环(也就是在程序中多设置2步);3,稍降Mg离子浓度,如果以前加1.5ul的,试试1-1.2ul;如果以上方案还不能解决,就要检查你的模板、
引物
和...
pcr
开始有
条带
,后来怎样都没条带
答:
2. 你做的时候带上一个你能做出
PCR
的正对照,表明你一次操作的正确性。3. 换Taq酶试试,看看是
不是
你的酶问题(因为Taq酶的保真性不高),看看能不能P
出来
,如果能,建议直接换NEB 的 phusion做PCR,我用过的PCR酶中,phusion的保真性和扩增效率相对其他而言都是最好的。质粒应该更容易扩增出...
在做
PCR
实验时为
什么
总是P
不出条带
?
答:
情况比较复杂,你得确认1.你的RNA没问题,没有被降解,cDNA合成没问题。可以用该材料的actin
引物
做PCR检测试试。2你P的基因如果是已知序列,那么设计引物应该很简单,如果是未知的,那么兼并引物没P出东西来是有可能的。若是根据已知序列设计的引物而没有P出产物那就是你PCR体系或者Tm有问题了,试试...
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