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质粒PCR后电泳出现 很多条带 怎么回事啊?
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推荐答案 2013-11-11
1.过火温度过低,可以提高退火温度2.检查PCR体系各浓度 引物浓度不要太高 一般10UM 质粒模板量一般1-10ng 过高和过低都可能导致非特异性3.TAq酶不能加太多 一般1.25U/50ul ,特别是高活性酶,高浓度会导致大量非特异性扩增。4.引物本身设计具有较大缺陷
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质粒PCR后电泳出现
很多条带
怎么回事啊?
答:
1.过火温度过低
,可以提高退火温度2.检查PCR体系各浓度 引物浓度不要太高 一般10UM 质粒模板量一般1-10ng 过高和过低都可能导致非特异性3.TAq酶不能加太多 一般1.25U/50ul ,特别是高活性酶,高浓度会导致大量非特异性扩增。4.引物本身设计具有较大缺陷 ...
请教关于
PCR产物电泳出现弥散条带
答:
通常是非特异扩增过多引起
,提高退火温度试试 PCR产物放置过久考虑产物降解;如果是PCR后及时上样,
考虑引物特异性较差或者模板不纯
(包括降解以及掺有别的DNA序列)
如果用PCR产物做模板的话,量太大
也会有这个现象。
胶没煮好
也会这样
PCR电泳出现多条带
答:
这种情况的原因可能很多,
比如引物设计的特异性不好,或者退火温度不合适等
。
PCR之后
的
电泳条带有好多条
是
怎么回事?
答:
引物的特异性设计有问题 或者你的引物加多了 导致了特异性的降低 或者
质粒有
污染 但是如果聚合酶或者dNTP加多了的话也是会降低特异性的 所以什么都不要加太多 不要以为加得越多反应越好
质粒PCR后电泳出现
很多条带
怎么回事
答:
更改
PCR
条件~提高退火温度~延长时间适当增加减少再看看~
我学姐做
PCR后
,把产物跑
电泳
,结果实验组和对照组在100bp处都
有条带
...
答:
应该是有污染,对照组什么都没加但是
有条带
,那就是在
PCR
体系里的东西有污染。
PCR后
进行DNA
电泳
跑胶得到那些
条带
是什么意思
答:
最下面的是引物二聚体,上面的有的是扩增片段,有的是非特性扩增产物
我学姐做
PCR后
,把产物跑
电泳
,结果实验组和对照组在100bp处都
有条带
...
答:
你确定100bp那块是
条带
,还是一团量的,这两种可是有差别的,如果对照没有加模板,基本上有两种可能:1.你的
PCR
反应引入了污染,不知道扩出了什么东西。2.100bp那块不是条带,而是引物二聚体
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