组织培养步骤:组织培养按以下程序进行:取材(5毫米大小)→材料用0.1%氯化汞(HgCl)消毒10分钟→制备外植体(3~5毫米大小)→接种(无菌操作)→增殖培养(25℃)→诱导不定根→炼苗→移栽。
操作过程始终在无菌条件下进行,外植体消毒要彻底,但不过分伤害其组织,整个过程严把无菌关。组织分化的控制:利用植物体的一小块组织培育出一棵完整的植株,需要经过细胞的分裂、生长和分化,包括组织和器官的生长和分化,这一系列的变化都是在植物激素的调控下进行的。在组织培养中使用的植物生长调节物质主要有生长素类,如吲哚丁酸、萘乙酸、吲哚乙酸等,这些激素类物质的作用是调控组织培养的材料向根的方向分化。细胞分裂素类,如6-苄基腺嘌呤(6-BA)、玉米素(Zitine)等,这类激素物质的作用是调控组织培养的材料向茎、芽的方向分化。生长素类激素与细胞分裂素两类激素的比例,控制着细胞和组织的分化方向。在组织培养中,常用6-苄基腺嘌呤1~2毫克/升诱导形成芽,而用萘乙酸0.5~1.0毫克/升和6-苄基腺嘌呤0.05~0.20毫克/升诱导形成根。