花卉的组织培养有哪几个步骤?

如题所述

消毒器具:在组织培养前,必须对玻璃器皿等进行彻底清洗,并可用洗衣粉刷洗以确保清洁。接种室和超净工作台需用70%酒精擦拭,并接受紫外线照射以消毒。所有用具同样要经过高温消毒处理。(2)选择培养材料:组培可利用多种植物部分,如根、茎、叶、花、芽、种子子叶和胚轴等。通常,选择初生且幼嫩的组织,因其具有较高的分裂能力。采集的花卉材料在接种前应保持新鲜,否则可能导致培养失败。(3)对培养材料消毒:采集的材料需先用自来水清洗,再用蒸馏水冲洗数次,之后用无菌纱布擦干,并切割成小块。将这些小块浸入70%酒精15至30秒,接着在30%漂白粉溶液中浸泡20分钟进行消毒,最后用无菌水冲洗3至5次以彻底清洁。(4)制备外植体:使用经过火焰消毒的刀具,剥去材料的鳞片、外皮等,切成0.2至0.5厘米的小段作为外植体。在整个过程中,避免用手直接接触材料。(5)进行接种培养:在无菌环境下,将准备好的外植体立即接种到培养基上。接种后,用无菌药棉封口,并将试管和三角瓶放置在培养架上。培养架应使用木制或铁制结构,通常分为4至5层,每层高度40至50厘米,日光灯装在上方,确保充足的照明和适当的温度,通常保持在25摄氏度至0摄氏度之间,也可根据需要采用日夜变温培养。
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