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载体抗性和筛选标记
用于基因无性繁殖,质粒
载体
至少需要具备哪些条件
答:
用于克隆表达的质粒
载体
通常涉及的三要素:1.复制子:又称复制起始区,包含控制质粒DNA复制起点和质粒拷贝数等遗传因素。复制子可分为为:①严谨型复制子②松弛型复制子。2.选择
标记
:由质粒编码的选择标记赋予宿主细胞新的表型,用于鉴定
和筛选
转化有质粒的宿主细胞。最常见的选择标记为抗生素
抗性
基因,...
基因
载体与
基因表达载体的区别?
答:
一、构成不同 基因表达
载体
:构成包括启动子、终止子、
标记
基因、目的基因。重组质粒:构成包括目的基因片段、质粒、酶。二、对象不同 基因表达载体:基因表达载体的对象通常是活细胞。重组质粒:重组质粒的对象通常是细菌。三、原理不同 基因表达载体:将不同来源的基因在体外构建杂种DNA分子,然后导入活细胞...
间接凝集反应中
载体
颗粒应该满足哪些基本条件
答:
3、含有复制起始位点,能够独立复制;通过复制进行基因扩增,否则可能会使重组DNA丢失。4、有一定的
标记
基因,便于进行
筛选
。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素
抗性
基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运
载体
往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行...
在基因表达
载体
上,
标记
基因能转录成信使RNA吗?
答:
这个你误解了,
标记
基因有自己的启动子,它只不过不是在你连的那个启动子后面而已。由于这个启动子对你连接的基因影响不大所以一般就省略了,所以它在细胞里是可以转录和表达的。
基因工程常用的
载体
?
答:
3必须带有
标记
基因,以便
筛选
4对受体细胞无害 5大小合适,便于操作 天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。问题八:基因工程需要哪些常见
载体
,都具有什么
抗性
? 有真核的,如:pEGFP-N1(卡那抗性)、pCMV-myc(氨苄抗性)、pCDNA系列、pBUDCE4(博来霉素抗性)原核表达载体如:pGEX...
pet质粒图谱本身带有his标签吗
答:
了解质粒的类型(原核/真核/穿梭质粒) Ori 的箭头指复制方向,其他元件标注的箭头多指转录方向(正向). 第二步:再看
筛选标记
,如
抗性
,决定使用什么筛选标记: (1)Ampr:水解β -内酰胺环,解除氨苄的毒性. (2)tetr :可以阻止四环素进入细胞. (3)camr:生成氯霉素羟乙酰基衍生物,使之失去毒性...
用同种限制酶切质粒和目的基因DNA,连接后,产生的
载体
-载体连接物不是也...
答:
我理解楼主的问题是这个样子。在连接之后的
筛选
其实是分两步的。第一步是筛选出含有
载体标记
基因的连接产物,这样的产物可能有载体-目的基因连接和载体-载体连接,利用的一般是载体上的标记基因的
抗性
培养(一般的标记基因是抗四环素或者是抗氨苄青霉素基因,只要用四环素或者是氨苄青霉素的培养基就可以了)。
质粒
载体
需具备哪些特征
答:
2. 具备多克隆位点。多克隆位点是质粒
载体
上可供多个外源DNA片段插入的位置。这些位点通常设计有多个不同的限制性酶切位点,方便目的基因与载体的连接操作,同时也提高了外源基因插入的效率与灵活性。3. 选择性
标记
基因。质粒载体上常带有选择性标记基因,如抗生素
抗性
基因等,用于在选择性培养基中
筛选
已...
关于生物基因工程的一些细节问题。望高人解答 ,感激不尽。
答:
第一个问题:利用
标记
基因所体现的比如颜色、
抗性
等性状是否有表现,可以检测重组质粒是否进入受体细胞; 然后顺便
筛选
,就是筛选出成功导入的细胞。DNA分子杂交技术是可以检测是否进入受体细胞,要制作探针,在分子水平操作,这个操作比较复杂,直接看标记基因的性状表达更直观,更简捷。因为运
载体
他本身就具备...
克隆
载体
不是不能够表达外源基因吗 没有sd序列,但是为什么它能够表达自 ...
答:
但不具备表达元件。而表达质粒有复杂的构成,为的是控制目标蛋白的表达,如各种启动子(T7),调节子(LacZ)等,而且以pET为代表的表达载体在菌体内都是低拷贝的,防止渗漏表达。是否含有表达系统元件,即启动子--核糖体结合位点--克隆位点--转录终止信号,这是用来区别克隆
载体和
表达载体的
标志
。参考...
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