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载体抗性和筛选标记
用作克隆
载体
的理想质粒一般具备哪些特点
答:
②在复制子外存在几个单一的酶切位点(或多克隆位点),以便目的DNA片段插入。③具有插入失活的
筛选标记
,理想的质粒
载体
应具有两种抗菌素
抗性标志
,如氨苄青霉素抗性基因(Ampr)和四环素抗性基因(Tetr)等,以便从平板中直接筛选阳性重组子。④分子量相对较小和较高的拷贝数。此外,质粒的缺点是容量较...
抗性
基因或
标记
基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?_百度...
答:
如果你的质粒是已经构建好,而且鉴定正确的,没有空
载体
质粒,那么,当你转化后,在
筛选
平板上转化(因为转化不是100%的效率,有些菌是没有质粒转入的),只有转入了该质粒的菌才能长起来,也就意味着这菌是带有你的目的基因。另外,
抗性
基因
和标记
基因(如营养缺陷基因)给予菌体以选择压力,有利于...
为什么
筛选
受体细胞时根据
抗性
基因而不是目的基因
答:
抗性
基因一般是位于运
载体
上,它属于
标记
基因。选择运载体时它必需要有合适的标记基因,就是因为标记基因的目的就是通过它判断重组DNA(目的基因和运载体结合的物质)是否导入了受体细胞。(如第4步中,如果表现有抗性,说明重组DNA已经进入了受体细胞,否则受体细胞不会表现出抗性。)如果导入了受体细胞,...
抗性
基因或
标记
基因在质粒上的话,它怎么起到检验目的基因的作用?_百度...
答:
如果你的质粒是已经构建好,而且鉴定正确的,没有空
载体
质粒,那么,当你转化后,在
筛选
平板上转化(因为转化不是100%的效率,有些菌是没有质粒转入的),只有转入了该质粒的菌才能长起来,也就意味着这菌是带有你的目的基因。另外,
抗性
基因
和标记
基因(如营养缺陷基因)给予菌体以选择压力,有利于...
如何用
标记
基因检测目的基因导入
载体
答:
一般
标记
基因的DNA序列是已知的,若选用抗氨苄青霉素基因,则可在目的基因导入后用氨苄青霉素来处理受体细胞,若无异常,则抗氨苄青霉素已合成,说明基因已得到表达。标记基因的作用在于便于检测目的基因的情况。因为标记基因和目的基因同位于运
载体
上,要导入都导入,要表达则都会表达。检测分三种,首先是通过...
作为基因工程的
载体
必须具备哪些条件
答:
便于进行
筛选
。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素
抗性
基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的
标记
基因。一般来说,天然运
载体
往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行人工改建。当前所使用的质粒载体几乎都是经过改建的。5、载体DNA分子大小应合适,以便操作。
标记基因的分类及其作用(
抗性
基因
和标记
基因的区别)
答:
3.在基因工程意义上来说,它是重组DNA
载体
的重要
标记
,通常用来检验转化成功和否。4.在基因定位意义上来说,它是对目的基因进行
标志
的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。5.举例“作为重组DNA载体的重要标记”举例:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素
抗性
基因(该基因可以认为是标记基因),当这种质粒和...
基因工程中
标记
基因有什么用.它是本来就在
载体
上的吗?
答:
而基因工程里所说的标记基因还包括植物
抗性标记
基因,它位于农杆菌双元
载体
的LB和RB之间,而LB和RB是质粒与染色体重组的两个位点,所以LB和RB之间的基因如抗性基因和与其串联的目的基因就能够整合到植物染色体中,这样,目的基因和抗性基因整合进入一个细胞,随着细胞的分裂,获得转基因植株。当然,并不能...
重组细胞导入受体细胞后,
筛选
含有基因表达
载体
受体细胞的依据是什么...
答:
2.常用的转化方法:将目的基因导入植物细胞:采用最多的方法是 农杆菌转化法,其次还有 基因枪法和 花粉管通道法等。将目的基因导入动物细胞:最常用的方法是 显微注射技术。此方法的受体细胞多是 受精卵。将目的基因导入...3.重组细胞导入受体细胞后,
筛选
含有基因表达
载体
受体细胞的依据是
标记
基因是否表达...
基因克隆的基本步骤有哪些
答:
五、重组子的筛选:从不同的重组DNA分子获得的转化子中鉴定出含有目的基因的转化子即阳性克隆的过程就是筛选。发展起来的成熟筛选方法如下:(1)插入失活法:外源DNA片段插入到位于
筛选标记
基因(抗生素基因或β-半乳糖苷酶基因)的多克隆位点后,会造成标记基因失活,表现出转化子相应的抗生素
抗性
消失或...
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