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sds page上样缓冲液
sds- PAGE上样缓冲液
4×和5×有什么区别
答:
1.在室温或不超过37℃的水浴中溶解
SDS-PAGE上样缓冲液
(5X)。水浴溶解后立即室温存放,尽量避免长时间置于水浴中。2.按照每4微升蛋白样品加入1微升蛋白上样缓冲液(5X)的比例,混合蛋白样品和蛋白上样缓冲液(5X)。3.100℃或沸水浴加热3-5分钟,以充分变性蛋白。4.冷却到室温后,直接上样到SDS-...
SDS-page
电泳
缓冲液
,样品缓冲液,分离胶缓冲液的区别
答:
电泳
缓冲液
是Tris-甘氨酸电泳缓冲液。
上样缓冲液
是
SDS缓冲液
,需要加入Tris-Hcl,DTT,SDS,溴酚蓝和甘油。分离胶配制过程中的缓冲液是PH8.8的Tris-Hcl 浓缩胶配制过程中的缓冲液是PH6.8的Tris-Hcl
sds
电泳
上样缓冲液
如何配置
答:
1. 量取1M Tris-HCl (pH6.8) 0.6 ml;50%的甘油5 ml;10%的
SDS
溶液2 ml;1%的溴酚兰1 ml;2. 加入去离子水定容至10 ml;3. 分装;4. 在4℃可保存数周,-20℃可保存数月之久。你还可以参考下面这个配方:2×SDS凝胶加
样缓冲液
组分(摘自《分子克隆》第三版)Tris-HCl pH6...
sds page上样
是点在
缓冲液
中,还是点在空孔中在加缓冲液啊
答:
可爱的同学,你的样本是要加在孔中的呀!如果是蛋白样品的话,要与
上样缓冲液
混合加热后用微量加样器加入孔的底部,如果是核酸的话,得用Laoding buffer 混合后加在孔的底部(如果是PCR产物,并且是预混的,就不用了,直接加就行)前提是先加缓冲液,把胶都没过。
SDS-PAGE
电泳
缓冲液
的上槽液与下槽液有何区别?
答:
在跑胶之前没区别,我们大概是配1X buffer 500mL,上面灌满,然后都倒下面就是了。跑之后,上槽中有些点样时没点进去的东西,下槽液中会含有一些跑出去的东西(跑得时间越长东西越多),所以就不太一样了。所以要是回收的话,上下槽要分别回收,不能混合。理论上说,都是可以重复用的。上槽的...
蛋白液体加
sds
loading buffer煮后结块
答:
将蛋白样品稀释之后再加
上样缓冲液
就能溶解了。如果是
SDS-PAGE
,加了上样缓冲液后依然煮蛋白后结块,那说明蛋白样品浓度过高,已经超出了SDS可以结合的浓度。建议降低样品的浓度即可。如果没有加含有SDS的上样缓冲液,那么就是蛋白样品被煮沸后变性沉淀了。加入溶解剂即可。
电泳实验中什么叫
上样缓冲液
答:
loading buffer 的中文名字叫
上样缓冲液
,6kb的缓冲液中可以显示两条带,前面的紫蓝色的条带是溴酚蓝,在0.6%、1%、1.4%和2%琼脂糖凝胶电泳中,溴酚兰的迁移率分别与1Kb、0.6Kb、0.2Kb和0.15Kb的双链线性DNA片段大致相同。后面的蓝色条带是二甲苯氰,它在1%和1.4%琼脂糖中电泳时,其迁移...
loadingbuffer和
sds-page
有什么区别
答:
lodingbuffer即电泳
上样缓冲液
、
sds-page
即聚丙烯酰氨凝胶电泳。loadingbuffer中含有甘油,起到沉降DNA(即PCR产物)的作用,色素溴酚蓝(BromophenolBlue)、二甲苯腈蓝FF(XyleneCyanolFF),可以观察电泳的进行情况。聚丙稀酰胺是由丙稀酰胺和N,N'-亚甲基双丙稀酰胺经共聚合而成。带电颗粒在电场作用下...
请教:2*
SDS上样缓冲液
的配法
答:
2×
SDS-PAGE 上样缓冲液
:0.5 M tris-HCl (pH 6.8) 20% 丙三醇 20% 20%SDS 20% 0.1%溴酚兰 5% 2-巯基乙醇 10% 双蒸水 25% 不调PH值,PH在配0.5 M tris-HCl 时已调,缓冲液呈蓝紫色。
sds page
跑蛋白的菌液处理?(具体见说明,请勿复制)
答:
loading buffer就是
上样缓冲液
的英文。另外,你的实验步骤里面,你打错了,第三步是10000rpm*2min,我非常肯定这个步骤一定是高速离心。第一个步骤,我们一般取1ml菌液离心10000rpm*5min吧,具体记得不太清楚了。然后加loading buffer好像是120微升,1倍的,100微升也OK啦,然后沸水浴5到10分钟,然后...
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