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载体抗性和筛选标记
基因工程常用的
载体
?
答:
3必须带有
标记
基因,以便
筛选
4对受体细胞无害 5大小合适,便于操作 天然质粒并不完全具备上述条件,所以都要进行人工改造。问题八:基因工程需要哪些常见
载体
,都具有什么
抗性
? 有真核的,如:pEGFP-N1(卡那抗性)、pCMV-myc(氨苄抗性)、pCDNA系列、pBUDCE4(博来霉素抗性)原核表达载体如:pGEX...
将目的基因导入受体细胞此步骤该如何检测?
答:
目的基因是要有特殊的
标记
基因的,导入受体细胞才能检验目的基因是否导入成功,如某段目的基因的抗青霉素的特性就可以用青霉素来检验。满意请采纳!
如何阅读分析质粒图谱
答:
这些穿梭质粒不仅可以在大肠杆菌中复制扩增,也可以在相应的枯草、酵母、动物或植物细胞中扩增和表达。这样利于对质粒的分子生物学操作和大量制备。 第二步:再看
筛选标记
,如
抗性
,决定使用什么筛选标记。 1. Ampr 水解β-内酰胺环,解除氨苄的毒性。 2. tetr 可以阻止四环素进入细胞。 3. camr 生成...
间接凝集反应中
载体
颗粒应该满足哪些基本条件
答:
3、含有复制起始位点,能够独立复制;通过复制进行基因扩增,否则可能会使重组DNA丢失。4、有一定的
标记
基因,便于进行
筛选
。如大肠杆菌的pBR322质粒携带氨苄青霉素
抗性
基因和四环素抗性基因,就可以作为筛选的标记基因。一般来说,天然运
载体
往往不能满足上述要求,因此需要根据不同的目的和需要,对运载体进行...
质粒作为基因工程中的运
载体
必须要有2个以上的限制酶的切点吗?_百度知 ...
答:
做为具有使用性的
载体
,一般最少有2个以上不同的限制性酶切位点,这样能够保证需要插入片段的效率和插入的片段插入的方向性。如果只有一个酶切位点,那在做连接反应时候载体自连现象会非常严重,同时插入片段有可能以2种相反方向插入载体,这样连接成功后还需要
筛选
方向正确的连接体,这样筛选过于困难,没...
标记
基因的作用
答:
3、在基因定位意义上,它是对目的基因进行
标志
的工具,通常用来检测目的基因在细胞中的定位。
标记
基因目的是为检测目的基因是否成功导入,由于一般都是有"鸟枪法"导入的目的基因,所以成功率并不是很高,目的基因的检测
和筛选
就显得很有必要。例如:大肠杆菌的某种质粒具有青霉素
抗性
基因,当这种质粒与外源DNA...
目的基因的连接物是什么?
载体
的连接物是什么?
答:
指的是原本被切开的
载体
本身并没有和目的基因连接而是载体本身自己又重新连接起来的产物,有实验室也称为载体自连产物.目的基因连接产物,意思很明确,指的是酶切-连接之后,获得的期望产物,就是目的片段插入载体并连接称为重组质粒的产物,用这个重组质粒,你便可以进行基因过表达了.建议你首先学些基因工程...
基因文库是怎么回事?
答:
因具抗生素基因,可以通过抗生素
抗性筛选
重组子。黏粒
载体
在构建时也加上了设在插入失活基因内的多克隆位点。黏粒载体的分子较小(2.8—24kb),但克隆容量很高,对外源DNA长度的要求是30~45 kb,上限几乎是入噬菌体载体容量(23 kb)的2倍,所以黏粒载体在核基因组文库构建上具有相当的优势,可克隆包括3,和5’调控区在...
如何
筛选
出含有目的基因的受体细胞,举
答:
利用基因表达
载体
上的
标记
基因
筛选
:例如:标记基因是四环素
抗性
基因,就用含有四环素的培养基培养活细胞,如果细胞活着,证明基因表达载体已经进入。不存活,表明没有进入受体细胞。
基因克隆的基本步骤有哪些
答:
五、重组子的筛选:从不同的重组DNA分子获得的转化子中鉴定出含有目的基因的转化子即阳性克隆的过程就是筛选。发展起来的成熟筛选方法如下:(1)插入失活法:外源DNA片段插入到位于
筛选标记
基因(抗生素基因或β-半乳糖苷酶基因)的多克隆位点后,会造成标记基因失活,表现出转化子相应的抗生素
抗性
消失或...
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