1，准备工作：
人工授精所有器械消毒结束后按顺序摆放在恒温干燥箱中（37度），授精室内清洁消毒后将
紫外线灯开20分钟，准备好毛巾（种公犬消毒用）、两个水盆（一个盛放消毒种公犬的消毒水。另一个盛放消毒用后器械的消毒水）、赃物桶，提前30分钟将恒温水浴锅启动（加热稀释液到30度），将室内温度提升到20度后，输精人员方可进入，人员着装后（白大衣、拖鞋、手套、帽子、口罩）即可开始人工授精工作。
2，采精：
种公采精后，先用毛巾将种公犬胯下及臀部至后腿上部的毛擦湿（避免采精时落入灰尘），然后采精，采出的精液连同采精杯应立刻放入加热的水浴锅中，用胶头滴管吸取一滴精液进行显微镜（搭配37度恒温载物台上）检测，检测合格方可进行稀释。
注意：种公犬头两次采精精液活力较弱、
死精较多为正常现象，是因为贮藏在睾丸里的精液时间过长，不要惊慌，多采几次后即可正常。
3，输精：
母狗保定后，先用医用棉签或手纸将母狗外阴部擦净，即可进行输精操作，先把开膣器或者膣镜灯外缘均匀涂上润滑剂，一边轻轻按摩母犬外阴，一边缓慢插入阴道；然后用一次性注射器套上输精针抽取精液，将母狗垂直提起臀部朝上，把精液缓慢注入子宫。
注意：如果在拔出开膣器或输精针时发现带有脓性分泌物，请提醒狗主人立即治疗，器械应单独消毒处理。如果在拔出开膣器或输精针时发现带有脓性分泌物，请提醒狗主人立即治疗，器械应单独消毒处理。开膣器和膣镜灯必须用小试管刷或者牙刷通入内部仔细刷洗，尤其是管的前端。消毒过的器械应该立即放入事先消毒好的医用托盘中或者消毒柜中分别盛放，进行消毒保存。使用前先将消毒柜的温度升至37度方可使用。