最近准备做基因敲除,利用的是同源重组的方法,由于是革兰氏阳性菌,在设计引物时对于左右同源臂有什么要求吗?对于待敲除的目的基因的侧面的启动子等原件应在引物设计的范围内吗?问题有点多,希望得到大家的帮助,在下感激不尽啊!