Dicer酶的酶切位点是什么？

Question

dicer属于RNA内切酶，那它识别特定基因吗？有专门的内切位点吗？还是就从dsRNA的头依次21~23nt切割？
3’端有 2个碱基突出的 dsRNA？我应该怎么设计引物呢？还是用T7 RiboMAX™ Express RNAi System就能合成这种dsRNA？

Answer 1

它识别的特定基因是体内广泛存在的siRNA和miRNA前体。Dicer酶的PAZ结构域特异性地识别 3’端有 2个碱基突出的 dsRNA,之后由RNase III结构域剪切生成siRNA或microRNA。