高效液相色谱仪样品一般用什么溶剂溶解？

Question

对于一支250×4.6mm得HPLC色谱柱，HPLC的绝对进样量一般不超过100UG。HPLC样品得浓度一般在什么范围？进样量范围是多少？如何配制样品？有那些操作要领？

Answer 1

HPLC样品的浓度这个需要看你分析的是什么样品，他的响应值是高还是低，检测项目是杂质检测还是含量检测，如果做有关物质，一般浓度较高，因为要检测出很小的杂质，根据响应值的不同来确定浓度，具体操作的时候可以做成不同浓度，来做比较，确定，一般选用浓度为样品定量限的200倍，含量的话，定量限20-100倍都可以。
普通柱子进样量较多选择10ul或者20ul，做聚合物那样的柱子进样量一般为200ul，这个没有特定多少，只要相关的方法学验证通过了就可以。
样品的配制，如果主要分析成分的溶解度，稳定性都没问题的话，多采用流动相或水、甲醇、乙腈等溶解，对于特殊的样品，可以自行选择溶剂，对溶剂的要求一般是可以让待测物质完全溶解且不影响待测物质的稳定性，还有空白溶剂的色谱图不出峰或者出峰但不干扰待测物质杂质峰。
操作要领，这个就按照标准操作规范上的来就行或者你们自行定制的SOP。

Answer 2

一般常用的有甲醇，乙腈等常用溶解。进样一般1微升即可。用小容量瓶（25毫升）配置。具体操作可以找一本化验员手册看看。网上也可以查到的。