细菌未知功能基因的克隆方法

Question

如题所述

Answer 1

真核生物和原核生物的启动子.真核基因通常间隔基因,外显子和内含子交替.真核生物的完整基因直接转化大肠杆菌,无用的相应子不能启动的mRNA转录和内含子不正确的剪切,当然,不能正确表达的.
胰岛素mRNA,通过RT-PCR和其cDNA扩增,然后的cDNA中的使用转移了在一个完整的在细菌中表达的表达单位矢量.
一般来说成功率是很大的,而且基本上也是你只能用的方法吧.但具体也要看你怎么设计.多分析几种相近细菌的该基因序列,同源比对,找到最保守的编码区,在这些位置设计引物,成功率可大大提高.
脊椎动物中,比如人,鼠,猪,牛,鸡,即使这么大的分类差别,还有基因中麻烦的内含子的问题,利用基因编码区的保守性来设计引物扩增目的基因,成功率也是很大的.
况且,合个引物,跑个PCR成本也不大,你完全可以去试验看看啊,再高的成功率你不跑一下,谁也说不准.

Answer 2

克隆，这一科学术语，随着1997年克隆羊多莉的诞生妇孺皆知，此后各国科学家们，利用体细胞克隆技术在牛、鼠、猫、狗等多种哺乳动物上获得成功，但一直没跨越灵长类动物屏障。注：本视频根据2019新人教版教材制作。