2009年江苏高考第34题（2）用Bst l与BamH l酶切，目的基因与质粒连接后可获得几种重组质粒，为什么是1种

Question

苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图( 为抗氨苄青霉素基因)，据图回答下列问题。 (1)将图中①的DNA用HindIII、BamH I完全酶切后，反应管中有 种DNA片段。 (2)图中②表示HindIII与Bam I酶切、DNA连接酶连接的过程，此过程可获得 种重组质粒；如答案：（1）4 （2）2；1
第2问中，换用Bst l与BamH l酶切目的基因时，可得到一段两端都是B酶切开的粘性末端的基因片段，但是与质粒重组时，正向连接和反向连接应该是获得两种重组质粒才对啊，为什么是1种呢？

Answer 1

图1①是的HindⅢ酶切点上的目标基因，经BamHⅠ酶两个切点，完全切割目的籍Yinqie“三刀”，它产生的四个片段。 2，用HindⅢ消化和Bam一分为四个片段的DNA的靶基因，所述第二绝缘的三个片段的粘性末端是相同的粘性质粒的末尾可以插入到一个质粒中以形成用Bst升的重组质粒，因此，对于两个切割和BamH两种酶，相同的碱基序列的识别，这两种酶，相同的切点，产生的粘性末端的切割，当然，同样，两个切点上的DNA的靶基因，靶基因的DNA切成三个片段，两端的中间片段的粘性末端，和质粒相同的粘性末端，可以被插入到一个质粒， ，它是仅形成的重组质粒。追问

换用Bst l与BamH l酶切目的基因时，可得到一段两端都是B酶切开的粘性末端的基因片段，但是与质粒重组时，正向连接和反向连接应该是获得两种重组质粒才对啊，为什么是1种呢？

Answer 2

没有
Bst l

Answer 3

对呀，为什么不考虑正接和反接的问题呢？