高效液相色谱出峰时间由多种因素决定：
1、固定相（色谱柱填料，长短，粒径）。
2、流动相（包括有机相水相配比，pH值，有机相组成，水相中缓冲盐组成，缓冲盐浓度，是否加入表面活性剂，是否加入离子对试剂等）。
3、流速（改变全部出峰时间，不会改变出峰顺序和相对保留时间）。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支，以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。
扩展资料：
高效液相色谱法有“四高一广”的特点：
1、高压：流动相为液体，流经色谱柱时，受到的阻力较大，为了能迅速通过色谱柱，必须对载液加高压。
2、高速：分析速度快、载液流速快，较经典液体色谱法速度快得多，通常分析一个样品在15～30分钟，有些样品甚至在5分钟内即可完成，一般小于1小时。
3、高效：分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果，比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度：紫外检测器可达0.01ng，进样量在μL数量级。
5、应用范围广：百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析，特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析，显示出优势。
6、柱子可反复使用：用一根柱子可分离不同化合物
7、样品量少、容易回收：样品经过色谱柱后不被破坏，可以收集单一组分或做制备。
参考资料来源：百度百科-高效液相色谱
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