◆动物细胞培养技术与制药
牛血清在细胞培养中的作用及产生的常见问题
现代生物技术包括
基因工程、细胞工程、酶工程和发酵工程,这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切的关系,特别是在生物医药领域,细胞培养更具有特殊的作用。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多都是通过细胞培养来实现的,基因工程乙肝疫苗大多是以CHO细胞作为载体;基因工程抗体药物的制备也离不开细胞培养。细胞工程领域更离不开细胞培养技术,杂交瘤
单克隆抗体的研究制备完全是通过细胞培养来实现的,发酵工程和酶工程有的也与细胞培养密切相关。总之,细胞培养在整个生物技术产业的发展中起到了很关键的核心作用。细胞培养的发展,
培养基的质量是关键,而培养基的构成中动物血清对细胞的生长繁殖起着重要作用。在动物血清中牛血清的应用又是最广泛的,所以牛血清的质量好坏直接影响生物制品的质量和安全性。
一、牛血清的主要成分
牛血清是一种成分复杂的混合物,其大部分成分已为人所知,但还有一部分仍不清楚,而且血清的组成及含量通常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而存在差异。牛血清主要成分有以下几类:
1、蛋白质类 包括白蛋白、
球蛋白、α-巨球蛋白(抑制
胰蛋白酶的作用)、胎球蛋白(促进细胞附着)、 转铁蛋白(能结合铁离子,减少其毒性和被细胞利用)、纤维粘连素(促进细胞附着生长)等;
2、多肽类 主要是一些促进细胞生长和分裂的生长因子,最主要的生长因子是血小板生长因子,还有成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,虽然在血清中含量很少,但对细胞的生长和分裂也起着重要作用;
3、激素类 激素对细胞的作用是多方面的。包括:
胰岛素:促进细胞摄取
葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;
类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用:
促
生长激素:促进细胞增殖的效应;
氢化可的松:血清中含有微量该成分,它可能具有促细胞贴附和增殖作用。但有人证明,血清
中的氢化可的松,在细胞密度较高时可能有抑制细胞生长和诱导细胞发生分化的作用。
4、其他成分 如氨基酸、葡萄糖、
微量元素等。在合成培养基中这些成分的作用并不明显,与蛋白相结合的微量元素对细胞生长起促进作用。