如何使目的基因与质粒结合形成重组质粒？

Question

如题所述

Answer 1

先用同一种限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，露出相对应的粘性末端，再用DNA连接酶使两者的粘性末端结合形成重组质粒。

质粒是目的基因的运载体，在用鸟枪法或人工合成法提取目的基因后，用限制性内切酶将质粒切开，使目的基因与切开的质粒具有相同的粘性末端。它们的碱基恰好配对，氢键自动结合，再用DNA连接酶将切口补上，重组质粒就形成了。

扩展资料

有两种情况可使杂交后代出现新的基因组合的个体（重组体）：

（1）非连锁基因的自由组合。例如纯合的非糯红米水稻品种与糯性白米水稻品种杂交，子二代有四种类型的植株，其中非糯红米和糯性白米的植株分别与两亲本的性状相同，称为亲本组合；另有非糯白米和糯性红米两种植株则是两亲本所没有的重新组合，即重组体。

（2）连锁基因的交换。例如，已知玉米种子的有色对无色为显性，饱满对凹陷为显性，用纯种有色饱满玉米与无色凹陷玉米杂交，子一代种子均为有色饱满，以F1与双隐性（无色凹陷）亲本回交，结果也出现四种类型，其中有色饱满和无色凹陷为亲本组合，约占96%；有色凹陷和无色饱满为新组合（重组体），约占4%，后者就是同源染色体的非姊妹染色单体上部分基因发生了交换的结果。

Answer 2

1、用相同的限制性内切酶分别处理目的基因、质粒（目的基因两端有酶切位点）
2、再把两种片段混合，加入DNA连接酶
3、还要筛选，因为有可能得到的不是目的基因+质粒，还可能目的基因+目的基因、质粒+质粒......
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Answer 3

首先质粒和目地基因要有相同的切割位点,再用限制性核酸内切酶切割目地基因和质粒,再把切好的目地基因和质粒用连接酶连接就行了.