革兰氏阳性菌和阴性菌的区别

如题所述

革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立。细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌不脱色,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G-)。为方便观察,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。芽孢杆菌和绝大多数球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏阳性反应;弧菌、螺旋体和大多数致病性的无芽孢杆菌都呈革兰氏阴性反应。

两者的区别:①细胞壁组成成分不同。革兰氏阳性菌细胞壁含大量的肽聚糖,含磷壁酸,不含脂多糖;革兰氏阴性菌含极少肽聚糖,含脂多糖,不含磷壁酸。两者的不同还表现在各种成分的含量不同,尤其是脂肪含量明显不同,革兰氏阳性菌脂肪含量为1%~4%,革兰氏阴性菌脂肪含量为11%~22%。

②细胞壁结构不同。革兰氏阳性菌细胞壁较厚,为20~80nm,结构较简单。革兰氏阴性菌细胞壁较薄,为10nm,其结构较复杂,分为外壁层和内壁层;外壁层又分3层,最外层是脂多糖,中间是磷脂层,内层为脂蛋白,内壁层含肽聚糖,不含磷壁酸。

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第1个回答  2008-10-31
两者主要是细胞壁的结构不同。
革兰氏阳性菌的细胞壁,是一层厚而致密的肽聚糖和磷壁酸组成。肽聚糖的肽链之间通过5个甘氨酸交联着。
革兰氏阴性菌的细胞壁则是多层结构,从内到外依次是:薄薄的肽聚糖层,脂蛋白层/周质层,磷脂层和脂多糖层。革兰氏阴性菌的肽聚糖结构也和革兰氏阳性菌的有所不同,肽链是直接交联在一起的。
细胞壁结构的不同,决定了两类细菌革兰氏染色结果(阳性紫色阴性红色)和对不同类抗生素敏感性的不同。
第2个回答  2015-05-14
(①革兰阳性菌等电点比阴性菌低,在同一pH条件下所带负电荷多,与代征点和的碱性染料结合力强,不易脱色;
②革兰阳性菌体内含有大量核糖核酸镁盐,可与进入体内的碘液、结晶紫牢固结合成大分子复合物。革兰阴性菌含核糖核酸镁盐很少,故易被脱色。)
③革兰阳性菌细胞壁结构致密,肽聚糖层厚,含脂质少,乙醇不易渗入脱色;革兰阴性菌细胞壁结构疏松,肽聚糖层薄,含脂质多,乙醇容易溶解脂类而渗入使之脱色。目前认为这种结构上的差异是染色反应不同的主要原因。本回答被提问者和网友采纳
第3个回答  2015-07-05

把细菌采用龙胆紫染色,

涂碘加强染色。

然后用酒精脱色,

革兰氏阳性菌不会被脱色呈现紫

色,革兰氏阴性菌会被脱色呈现红色。

在治疗上,

大多数革兰氏阳性菌都对青霉素敏感;而

革兰氏阴性菌则对青霉素不敏感,而对链霉素、氯霉素等敏感

两者主要是细胞壁的结构不同。

革兰氏阳性菌的细胞壁,是一层厚而致密的肽聚糖和磷壁酸组成。肽聚糖的肽链之间通过5个甘氨酸交联着。

革兰氏阴性菌的细胞壁则是多层结构,从内到外依次是:薄薄的肽聚糖层,脂蛋白层/周质层,磷脂层和脂多糖层。革兰氏阴性菌的肽聚糖结构也和革兰氏阳性菌的有所不同,肽链是直接交联在一起的。

细胞壁结构的不同,决定了两类细菌革兰氏染色结果(阳性紫色阴性红色)和对不同类抗生素敏感性的不同。

第4个回答  2006-12-13
革兰氏染色法是细菌学中广泛使用的一种鉴别染色法,1884年由丹麦医师Gram创立
细菌先经碱性染料结晶染色,而经碘液媒染后,用酒精脱色,在一定条件下有的细菌此色不被脱去,有的可被脱去,因此可把细菌分为两大类,前者叫做革兰氏阳性菌(G+),后者为革兰氏阴性菌(G—)。为观察方便,脱色后再用一种红色染料如碱性蕃红等进行复染。阳性菌仍带紫色,阴性菌则被染上红色。有芽胞的杆菌和绝大多数和球菌,以及所有的放线菌和真菌都呈革兰氏正反应;弧菌,螺旋体和大多数致病性的无芽胞杆菌都呈现负反应。

[原理]:革兰氏染色目前有三种观点:等电点学说、化学学说和渗透学说。

1. 等电点学说,革兰氏阳性菌的等电点在PH2-3,比阴性菌(PH4-5)低,加之碘为弱氧化剂,可降低革兰氏阳性菌的等电点,致使两类菌的等电点差异扩大,因此阳性菌和碱性染料的结合力比阴性菌更强。

2.化学学说,碘液在菌体内与结晶紫结合后又和菌体内核糖核酸镁盐-蛋白质复合物结合,此结合物不易被丙酮酒精脱掉,呈革兰氏染色阳性。因革兰氏阴性菌缺乏核糖核酸镁盐,故对碘与结晶紫结合物摄取少,且不牢固,易被丙酮酒精脱色而呈革兰氏染色阴性。

3.渗透学说,乙醇使阳性菌所含粘肽多糖脱水而致细胞壁间隙缩小,通透性降低,在菌体内保留了染料-碘复合物,呈紫色。阴性菌含粘肽少,细胞壁变化不大,通透性不受影响,菌体内的染料-碘复合物较易透出,失去紫色,被复染成为红色。

[试剂]:Crystal violet(结晶紫)、Gram Iodine(碘液)、Decolourizer(丙酮酒精)、Safranin(稀释沙黄)

[操作]:

1.标本处理:(1).有菌部位的标本,如痰液、粪便、各种拭子、创面等可直接涂片。

(2).无菌部位的标本,如脑脊液、胸水、腹水、胆汁、尿液、关节液等,应取适量标本(最高可达5-7ml),经3000rpm 离心10min.,取沉渣涂片染色。

2.涂片制作:菌液涂片时,用接种环沾取菌液点在载玻片上,标本可直接在玻片上涂布;菌落涂片时,先取生理盐水一滴,置玻片上,用接种针挑取菌落在盐水中涂布。制作的涂片应自然干燥,并经火焰固定,固定的温度不宜过高,以玻片背面接触手背不烫为准,否则可能使细菌形态改变。将固定后的涂片进行染色。

3. 染色方法:

(1).加上Crystal violet(结晶紫)后,染色3-5秒或更久,之后用自来水冲洗之。

(2).加上Gram Iodine(碘液)后染色3-5秒或更久,之后用自来水冲洗之。

(3).以Decolourizer(丙酮酒精)脱色约5-10秒,并用自来水冲洗之。

(4).加上Safranin(稀释沙黄)后,染色3-5秒或更久,之后用自来水冲洗之。

(5).吸干或在空气中凉干后,置油镜镜检。

4.结果观察:紫色为革兰氏阳性,红色为革兰氏阴性。

[报告方式]:革兰氏染色:检出革兰氏阳性球菌 ;革兰氏阴性球菌

检出革兰氏阳性杆菌 ;革兰氏阴性杆菌

[注意事项]:

1.标本涂片不能太厚,严格按操作要求进行。

2.玻片通过火焰温度不能太高。

3.若涂片较厚,应延长脱色时间,直至不在出现紫色为止。

[临床意义]:通过革兰氏染色,将细菌分为革兰氏阳性和革兰氏阴性,便于临床治疗。

[附]

1 沙黄(番红)Safranine T [C20H19ClN4=350.85]
红棕色粉末;碱基性染料。在水中溶解,在乙醇中易溶。

2 碘液配制:0.01mol/l碘液——称取1.3g碘,置于50mol烧杯中,加入2.5g碘化钾及25毫升蒸馏水,不断搅拌之,使其溶解均匀。再加0.2mol浓盐酸(体积质量1.19g/cm3),再加蒸馏水稀释到1000mol。溶液应贮藏在棕色试剂瓶中,储于低温暗橱内。有效期为一个月左右

革兰氏阴性菌,以[大肠杆菌]为代表。大肠杆菌为兼气性菌种,一般生存於肠道中及厌氧的还境中。革兰氏阴性菌细胞壁的特徵为有一层out member 与阳性菌种不同。目前对大肠杆菌的研究很多,除了它是一般食物中是否有被污染的指标外,很多分子生物学方面的研究皆需要使用到大肠杆菌当作实验宿主
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