使用PCR技术前提“一段已知目的基因的核苷酸序列”如何理解

Question

这句话是不是病句？
是不是说，需要一段核苷酸序列，这段核苷酸序列是已知的目的基因的核苷酸序列？
但是如果是这样，不是应该说“一段已知的目的基因的核苷酸序列”吗？
但是如果改成这样，“已知的”这个词是又是修饰目的基因还是修饰核苷酸序列的呢？
是目的基因已知，还是核苷酸序列已知？
还有，如果所需核苷酸序列是已知的目的基因中的一段
那么这段核苷酸序列只要是已知的目的基因上的就可以了吗？没有位置要求？如果这段核苷酸序列处在目的基因正中间，那么合成DNA互补链的时候只朝同一个方向，另一个方向的目的基因不就合成不到了吗？

Answer 1

根本上说是已知核苷酸序列。如果序列知道了，它在什么基因上也就知道了（可以通过BLAST搜索的）。PCR的过程是这样的，你首先需要化学合成两条短的单链DNA序列，叫引物（可以直接叫一些公司帮你合成），这两条序列分别在互补链上，并且指向对方。PCR时需要把大量的引物加到反应体系中去，这样最终扩增出来的序列就是引物及其之间的DNA序列。之所以要已知序列（只需要知道两端的序列），就是为了设计引物（与要扩增的DNA片段两端的序列相同），不知道序列是无法设计引物的，也就不无扩增出目的DNA来。

Answer 2

应该是要知道目的基因它的核苷酸序列，因为用PCR扩增一段基因需要先知道它的序列从而制出相应的引物。另外，目的基因不是一定是确定的吗，然后才通过PCR技术只扩增目的基因那一段序列，而其他部分的基因则不扩充。反应最初是加入含有目的基因的一段基因片段，不需知道其位置，引物可以使酶从目的基因两端契入，从而开始复制。契入的酶相向移动，但补链的确只朝同一方向，似乎是正向移动的酶合成的是一段段不连续的片段，逆向的则是在间断处停留并将之补全连接（这点我也不是很确定......)追问

高中没教这么复杂吧。。。我有点乱

Answer 3

应该目的基因已知（核苷酸序列已知就可以用化学方法合成了）

PCR第一次没有切出目的基因，第二次切除一半，多次扩增原基因就可以忽略不计了

Answer 4

是基因两端的部分序列，十几二十个就行，作为pcr时的引物。pcr需要两个引物，即正向和反向两个。追问

那个序列一定要是目的基因两边的吧？中间的不行吧？

追答

中间的不行

Answer 5

教材表述很成问题，意思让人晕！应该是两段系列已知，位于目标DNA两端